SVCV G蛋白與宿主蛋白14--3--3β-α--A相互作用的研究.pdf

1、鯉春病毒血癥病毒(Spring Viraemia of Carp Virus，SVCV)屬于彈狀病毒科鯉春病毒屬，是一種嚴重危害鯉養(yǎng)殖安全的傳染性病原，感染魚后能引起典型的鯉春病毒血癥(Spring Viraemia of Carp，SVC)。該病在歐洲、亞洲和北美洲的鯉養(yǎng)殖區(qū)是較為常見的流行性疾病，雖然該疾病在我國還未檢測到大規(guī)模暴發(fā)，但作為鯉養(yǎng)殖大國，該病對我國的鯉養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)構(gòu)成潛在的巨大威脅。SVCV感染能引起魚體體表出血、腹水和泄

2、殖孔發(fā)炎等癥狀，嚴重者導(dǎo)至死亡。目前，SVCV的致病機理和入侵機制尚不清楚。SVCV結(jié)構(gòu)蛋白糖蛋白(Glycoprotein，G)位于病毒囊膜上，在病毒入侵細胞時的內(nèi)吞過程中發(fā)揮作用，該蛋白可以決定病毒的血清型。研究表明，SVCV蛋白與宿主蛋白的相互作用對病毒的免疫逃逸和復(fù)制產(chǎn)生重要影響。因此，研究SVCVG蛋白與宿主蛋白的相互作用對揭示該病毒的入侵與致病機理、抗病毒藥物和預(yù)防疫苗的開發(fā)具有重要的科學(xué)意義。
　　首先，利用串聯(lián)親和

3、純化(Tandem Affinity Purification，TAP)與質(zhì)譜分析相結(jié)合的方法，在FHM細胞中篩選出可能與SVCV G蛋白相互作用的宿主蛋白。其次，用激光共聚焦和免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation，Co-IP)共同驗證，實驗結(jié)果表明了SVCV G可以與宿主14-3-3β/α-A蛋白發(fā)生相互作用。通過對14-3-3β/α-A蛋白序列進行比對和同源性分析，發(fā)現(xiàn)14-3-3β/α-A在哺乳動物、鳥類、兩棲