一例急性間歇性卟啉病的家系調查及文獻復習.pdf

1、背景及目的:
　　 急性間歇性卟啉病(AcuteIntermittentPorphyria，AIP)是一種常染色體顯性遺傳病，是由于亞鐵血紅素生物合成過程中編碼羥甲基膽素合成酶的基因(hydroxymethylbilanesynthase，HMBS，EC4.3.1.8)變異致酶活性下降引起的。體內卟啉前體δ-氨基-ly-酮戊酸（aminolevulinicacid，ALA）和膽色素原（porphobilinogen，PBG）會大

2、量積累，導致尿液中ALA和PBG的水平升高。在月經來潮、藥物、壓力等誘因下出現腹痛、神經系統(tǒng)和心血管等相關癥狀，急性期甚至可以引起呼吸肌麻痹而致死。
　　 迄今為止，一共發(fā)現了HMBS基因的300多個突變類型，包括錯義、無義、插入、重復、缺失等。對存在突變的HMBS基因產物進行酶活性檢測，發(fā)現部分突變后HMBS的酶活性明顯下降。到目前為止，國外已有大量關于AIP家系基因突變的報道，然而在國內，關于該病分子機理方面的研究報道僅有1

3、例，卻未找到相應突變位點。本研究通過對一例急性間歇性卟啉病患者及其家系進行臨床及分子生物學研究，以期了解該家系HMBS基因的突變位點，為家系中攜帶突變基因的潛在發(fā)病者提供預防建議。
　　 方法:
　　 患者為28歲女性，漢族人，以“腹痛6天，突發(fā)肢體抽搐伴意識障礙7小時”為主訴，于2010年7月17日入大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院，查尿色略加深，在陽光下曝曬10h后，尿液可迅速變?yōu)榧t色，尿PBG（-），尿膽紅素(+)，尿膽原

4、（±）。其大姑母26歲時出現與月經、懷孕相關的腹痛，查PBG(+)，診斷為AIP，誘因為月經來潮，為先證者。其父親40歲時因工作壓力大出現胃部疼痛，伴尿色變紅，但未就診自行緩解。患者具有典型AIP臨床癥狀，且家族史明確，AIP診斷明確。采集患者家系中父親、母親、2個姑母、1個叔叔、2個表弟和1個堂妹的外周血，提取基因組DNA，共設計9對引物，通過聚合酶鏈式反應(PCR)技術擴增HMBS基因的15個外顯子序列，測序后通過Mega5.0軟件

5、對外顯子堿基序列和氨基酸序列進行比對分析，篩查突變位點。
　　 結果:
　　 患者及其父親、小姑母的兒子、先證者均于Exon10發(fā)現R173W(517C＞T)突變，編碼氨基酸由精氨酸變成了色氨酸;先證者同時于Exon15發(fā)現突變H305N(1070C＞A)，編碼氨基酸由組氨酸變成天冬酰胺;患者母親于Exon15發(fā)現突變R321L(1119G＞T、1120T＞A)，編碼氨基酸由精氨酸變成亮氨酸。所有研究對象均于Exon1非

6、編碼區(qū)發(fā)現突變93C＞T;患者父親同時發(fā)現突變6delA，因兩種突變均位于非編碼區(qū)，不表達蛋白質，為無義突變?；颊咝」媚讣捌鋬鹤?、叔叔及其女兒均于Exon3發(fā)現突變223C＞T，但編碼氨基酸不變，仍為精氨酸，為無義突變?；颊叩母赣H、小姑母均于Exon10發(fā)現突變763G＞T，但編碼氨基酸不變，仍為纈氨酸，為無義突變。
　　 結論:
　　 1.患者HMBS基因Exon10發(fā)現517位堿基由C突變成T(517C＞T)，使得1

7、73位氨基酸由精氨酸變成了色氨酸(R173W)，為雜合突變，該突變遺傳自其父親;同時先證者及其兒子亦發(fā)現了此突變。
　　 2.R173W突變既往曾在多個國家的家系中報道過，而在我國尚屬首例報道。與其他突變相比，此突變更能影響HMBS的活性，導致AIP急性發(fā)病期的臨床癥狀更加嚴重，且外顯率高。先證者的兒子目前尚未發(fā)病，但攜帶此突變基因，應避免各種誘發(fā)因素，預防AIP急性發(fā)作。
　　 3.先證者同時于Exon15發(fā)現突變H3