豬繁殖與呼吸綜合征病毒細(xì)胞受體CD163、Sn的克隆及功能鑒定.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合癥病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus,PRRSV)是豬繁殖與呼吸綜合癥(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)的病原體。PRRSV主要引起母豬的流產(chǎn)和仔豬的呼吸障礙。從上世紀(jì)90年代發(fā)現(xiàn)以來,PRRS在全球范圍迅速廣泛傳播,給世界養(yǎng)豬帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
　　 PRRSV在體

2、內(nèi)主要感染分化良好的巨噬細(xì)胞和肺、胸腺、扁桃體、脾、淋巴結(jié)等處的巨噬細(xì)胞。PRRSV侵染靶細(xì)胞的先決條件是與宿主細(xì)胞吸附,而宿主細(xì)胞表面的受體是完成這種吸附過程必不可少的。研究發(fā)現(xiàn),硫酸乙酰肝素(Heparin Sulphate,HS)、唾液酸粘附素(Sialoadhesin,Sn)和CD163(Cluster of Differentiation163)分子是PAM上存在的能與PRRSV結(jié)合,介導(dǎo)PRRSV侵入PAM細(xì)胞、與PRRSV

3、感染相關(guān)的三個重要受體分子。
　　 為進(jìn)一步研究CD163和Sn分子在PRRSV感染過程中作用,本研究成功克隆了PRRSV的兩個細(xì)胞受體CD163分子和Sn,并構(gòu)建了真核表達(dá)載體PIREShyg3.0-CD163和pcDNA3.1-Sn。通過將PIREShyg3.0-CDl63和pcDNA3.1-Sn分別瞬時轉(zhuǎn)染PK-15細(xì)胞,利用免疫熒光和感染實驗研究了CD163分子和Sn在PRRSV感染過程中的作用。結(jié)果表明:Sn和CD16