鵝血蛋白組分對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、胃癌(Gastric cancer,GC)為世界上多發(fā)的消化方面惡性腫瘤,給人民身心健康帶來(lái)了巨大危害。胃癌的全世界惡性腫瘤發(fā)病率及死亡率的排名仍然處于前列。近幾年,我國(guó)惡性腫瘤中胃癌的發(fā)病率及死亡率均處于第三位,給社會(huì)和家庭帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。進(jìn)展期胃癌的生存率低,可能與醫(yī)治中的并發(fā)癥、毒副作用和耐藥性等方面有關(guān)。所以探尋毒性低、效果顯著的抗腫瘤藥值得期待。
  臨床上普遍使用的一些抗腫瘤中藥,毒性低且效果顯著。植物藥抗腫瘤的

2、主要成分經(jīng)證實(shí)通常是多糖、短肽及黃酮類(lèi)等化合物;而動(dòng)物藥的主藥成分為短肽,包括毒素和抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs),毒素的作用機(jī)制主要為通過(guò)短肽誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,同時(shí)動(dòng)物體內(nèi)分泌的多種抗菌肽具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的效果。因此,從已知中藥出發(fā),分離其中有效活性成分來(lái)研發(fā)安全高效的抗腫瘤藥物潛力巨大。
  鵝血(Goose blood)屬于中醫(yī)動(dòng)物藥范疇,是中醫(yī)治療胃癌常用的成分之一。由于尚無(wú)鵝血醫(yī)治胃癌的正式

3、文獻(xiàn)報(bào)道,因此我們擬觀(guān)察鵝血有效組分中多肽和蛋白質(zhì)對(duì)胃癌細(xì)胞體外增殖的影響。
  目的:探討鵝血有效蛋白組分對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響,并通過(guò)質(zhì)譜鑒定初步了解鵝血有效組分的多肽和蛋白組成及其功能。
  方法:
  1.取鵝血清,使用30 kD和10 kD超濾管分級(jí)分離鵝血有效成分,再取部分10 kD鵝血有效成分,進(jìn)一步使用3 kD超濾管分離鵝血中小分子多肽成分,并對(duì)鵝血各組分中蛋白定量分析。
  2.取培養(yǎng)獲得的處于對(duì)

4、數(shù)生長(zhǎng)期的人胃癌細(xì)胞株HGC-27和SGC-7901備用,分別加入各組鵝血蛋白組分、陽(yáng)性對(duì)照化療藥5-FU、空白對(duì)照作用36小時(shí)后,用MTS法算出鵝血各蛋白分組的生長(zhǎng)抑制率。
  3.對(duì)有效鵝血蛋白組分溶液內(nèi)酶解20小時(shí)后,采集和分析提取出的酶解多肽,質(zhì)譜鑒定有效鵝血蛋白組分的構(gòu)成。
  結(jié)果:
  1.鵝血蛋白各分組都具有抑制人胃癌細(xì)胞株的效果,各分組間效果不同。
  2.30 kD組和10 kD組均表現(xiàn)良好的

5、抑制效果,較3 kD組作用更加顯著,其中10 kD組的生長(zhǎng)抑制率分別為41.37%±5.94%(P<0.05)和12.05%±9.03%(P<0.05);與陽(yáng)性對(duì)照的化療藥5-FU組的生長(zhǎng)抑制率65.46%±10.40%(P<0.05)和78.27%±4.08%(P<0.05),其作用稍弱。結(jié)果提示,鵝血清中起作用的蛋白組分大多集中在10 kD組。
  3.10 kD組10倍稀釋后,其對(duì)胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用效果不夠明顯,表明其作

6、用方式比較溫和。
  4.質(zhì)譜分析鵝血清中10 kD組,以進(jìn)一步了解可能起作用的蛋白組分。質(zhì)譜分析的結(jié)果表明,共獲得135個(gè)蛋白或多肽,其中功能已知的蛋白為60個(gè),與其他物種有類(lèi)似功能結(jié)構(gòu)域的蛋白48個(gè)和未知蛋白27個(gè),參照物種相近的綠頭鴨( Anas platyrhynchos)的基因信息獲取鵝血大部分蛋白或多肽序列。通過(guò)質(zhì)譜獲得的所有蛋白的氨基酸數(shù)目在43~3201個(gè)之間,其中小于130個(gè)氨基酸的有19個(gè)蛋白或多肽。該組分獲得

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