環(huán)氧化酶抑制劑對Her-2高表達的人胃癌細胞NCI-N87增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　1探討環(huán)氧化酶-2(COX-2)抑制劑對體外培養(yǎng)Her-2高表達的人胃癌細胞NCI-N87的抑制增殖及誘導凋亡影響。
　　2初步探討COX-2抑制劑下調Her-2蛋白表達機制。
　　方法：
　　1常規(guī)培養(yǎng)人胃癌細胞NCI-N87。
　　2不同濃度的塞來昔布(celecoxib)作用于人胃癌細胞NCI-N87，應用四甲基偶氮唑藍(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)比

2、色法測定細胞光密度值(optical density，OD)，計算出生長抑制率。研究celecoxib對人胃癌細胞NCI-N87增殖的影響。
　　3采用流式細胞術(flowcytometry，F(xiàn)CM)檢測 celecoxib對NCI-N87細胞周期分布及凋亡的影響。
　　4采用流式細胞術(flowcytoetry，F(xiàn)CM)檢測MGC803、NCI-N87細胞的Her-2蛋白的表達情況及celecoxib對NCI-N87細胞H

3、er-2蛋白表達的影響。
　　5采用細胞免疫組化法SP(streptavidin-perosidase)法檢測NCI-N87的Her-2蛋白的表達情況及celecoxib對NCI-N87細胞Her-2蛋白表達的影響。
　　結果：
　　1不同濃度的celecoxib(10umol/l、20 umol/l、40 umol/l、80 umol/l、100 umol/l)作用NCI-N87細胞24h、48h、72h后可抑制細胞

4、的增殖。在10 umol/l-100umol/l濃度范圍內隨濃度的增加，抑制作用逐漸增強，且隨著celecoxib作用時間的延長，抑制作用也逐漸加強。與對照組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。說明celecoxib對NCI-N87細胞的抑制作用呈時間-劑量依賴關系。
　　2不同濃度的celecoxib(20 umol/l、40 umol/l、80 umol/l)可誘導NCI-N87細胞的凋亡，48小時凋亡率分別為23.69±

5、0.29％、36.32±0.38％、42.40±0.55％。且隨著celecoxib濃度的增加，NCI-N87細胞的凋亡率逐漸增加，與對照組相比具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　3不同濃度的celecoxib(20 umol/l、40 umol/l、80 umol/l)作用于NCI-N87細胞48小時后，能使G1期細胞百分數(shù)明顯上升，S期細胞百分數(shù)明顯下降，使細胞周期停滯于G1期，與對照組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)

6、，塞來昔布對人胃癌細胞NCI-N87 G2期細胞百分比無明顯影響，與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　4不同濃度的celecoxib(20 umol/l、40 umol/l、80 umol/l)作用于NCI-N87細胞48小時后，可以下調Her-2蛋白的表達，且隨著濃度的增加下調也增加，與對照組相比具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　結論：
　　1塞來昔布可抑制體外培養(yǎng)的人胃癌細胞NCI-N87細胞增