α-細辛醚調控小膠質細胞介導炎癥反應的抗癲癇作用研究.pdf

1、第一部分α-細辛醚對模型大鼠癲癇后認知功能及腦內免疫炎癥反應的影響
　　目的:研究α-細辛醚對Li-pilocarpine模型大鼠癲癇自發(fā)反復發(fā)作以及學習記憶功能的影響，并探討α-細辛醚對癲癇后大鼠腦組織內小膠質細胞介導的免疫炎癥反應的作用，以明確α-細辛醚的抗癲癇作用及其調控免疫炎癥反應的關鍵環(huán)節(jié)及其作用靶點。
　　方法：建立大鼠Li-Pilocarpine癲癇模型，隨機分為正常對照組，模型組以及α-細辛醚干預組(200

2、mg.kg-1)，錄像記錄分析大鼠癲癇自發(fā)反復發(fā)作的潛伏期、頻率，水迷宮實驗觀察各組大鼠學習記憶能力，免疫組化法觀察α-細辛醚對各組大鼠腦組織內小膠質細胞活化的影響，EMSA法檢測腦組織內NF-κB活化、入核，Western-blotting法檢測NF-κB活化關鍵蛋白IκB-α、IKK-β及其磷酸化形式的表達，ElISA法檢測各組大鼠腦組織內炎癥因子IL-1β、TNF-α含量。
　　結果：與實驗組相比，α-細辛醚干預可使大鼠自發(fā)

3、反復發(fā)作潛伏期延長，癲癇發(fā)作頻率降低（P＜0.05），并可改善Li-pilocapine模型大鼠癲癇后學習記憶及認知功能（P＜0.05）；癲癇后大鼠腦內小膠質細胞活化增殖以及腦內炎癥因子 TNF-α、IL-1β較對照組表達明顯增多（P＜0.05），且在癲癇后3天達到高峰；與模型組相比，α-細辛醚可抑制Li-pilocapine模型大鼠癲癇后小膠質細胞活化增殖以及腦內炎癥因子TNF-α、IL-1β表達（P＜0.05）；模型組大鼠癲癇后腦內

4、NF-κB活化入核增多，其抑制單位IκB-α及IKK-β下調失活，α-細辛醚干預組大鼠腦內NF-κB活化入核減弱，而IκB-α及IKK-β表達明顯高于模型組（P＜0.05）。
　　結論：α-細辛醚具有確切的抗癲癇作用，且可改善癲癇后大鼠學習記憶及認知功能；α-細辛醚可抑制癲癇后大鼠腦內小膠質細胞活化和炎癥因子TNF-α、IL-1β表達；α-細辛醚可抑制癲癇后大鼠腦內NF-κB信號通路的激活。
　　第二部分α-細辛醚對脂多糖誘

5、導小膠質細胞炎癥反應的影響
　　目的:研究α-細辛醚對脂多糖（LPS）誘導大鼠小膠質細胞免疫炎癥反應的影響。
　　方法:原代培養(yǎng)大鼠小膠質細胞，LPS誘導活化，隨機分為正常對照組、模型組和不同濃度α-細辛醚干預組，免疫熒光觀察小膠質細胞形態(tài)學變化， EMSA檢測各組細胞 NF-κB活化入核情況， Western-blotting法檢測各組細胞IκB-α、IKK-β及其磷酸化形式的表達，ElISA法檢測各組炎癥因子IL-1β、

6、TNF-α的變化。
　　結果：與正常對照組比較，模型組小膠質細胞活化增強，胞內NF-κB活化入核增加，IκB-α、IKK-β下調失活，炎癥因子IL-1β、TNF-α表達明顯增高（P＜0.05），并在活化后3h時達到高峰，與模型組相比，不同濃度的α-細辛醚可抑制小膠質細胞活化，并對胞內NF-κB活化入核，IκB-α、IKK-β的失活以及炎癥因子的表達均有抑制作用（P＜0.05），其作用呈劑量依賴性，且100μg.mL-1α-細辛醚作