豬糞堆肥中微生物變化規(guī)律及芽孢桿菌分離與鑒定.pdf

1、隨著集約化畜牧業(yè)迅猛的發(fā)展，大量的畜禽糞便造成了環(huán)境污染，并成為限制畜牧業(yè)持續(xù)發(fā)展的重要因素。畜禽糞便中含有豐富的肥源，如果用科學(xué)的方法對(duì)其處理，不僅可以控制污染，保護(hù)環(huán)境，還可以變廢為寶。好氧堆肥工藝具有經(jīng)濟(jì)，簡(jiǎn)便，不需要外加能源，無(wú)二次污染等特點(diǎn)，是目前處理糞便的主要方式之一。
　　 本次試驗(yàn)在華中農(nóng)業(yè)大學(xué)豬場(chǎng)，采用新鮮豬糞摻以輔料，鋸末和米糠，按照條剁式自然堆肥系統(tǒng)自然堆肥。堆肥過(guò)程是由相關(guān)微生物群體進(jìn)行的生物轉(zhuǎn)化過(guò)程。本

2、試驗(yàn)通過(guò)變性梯度凝膠電泳(DGGE)，傳統(tǒng)富集培養(yǎng)和平板計(jì)數(shù)法對(duì)堆肥化過(guò)程中微生物的區(qū)系動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行了研究。
　　 堆肥結(jié)果表明，在堆肥化過(guò)程中，微生物數(shù)量總的趨勢(shì)是細(xì)菌的數(shù)量最多，放線菌次之，真菌的數(shù)量最少。真菌包括霉菌和酵母菌。升溫期微生物的數(shù)量始終高于高溫微生物。當(dāng)堆肥發(fā)酵結(jié)束后，降溫期微生物的數(shù)量低于發(fā)酵初始水平，高溫放線菌和高溫真菌的數(shù)量試驗(yàn)結(jié)束后低于初始水平，高溫細(xì)菌的數(shù)量在整個(gè)堆肥化過(guò)程中變化不大。通過(guò)DGGE分析

3、表明：發(fā)酵過(guò)程中細(xì)菌的種類(lèi)發(fā)生了明顯的更迭現(xiàn)象。堆肥初期主要以芽孢桿菌屬，梭菌屬，解脲芽孢桿菌屬等細(xì)菌占優(yōu)勢(shì)；中期梭菌屬，芽孢桿菌屬，假單孢菌屬等細(xì)菌占優(yōu)勢(shì)；后期梭菌屬，假單孢菌屬等占優(yōu)勢(shì)；而在整個(gè)堆肥化過(guò)程中芽孢桿菌屬，梭菌屬，和假單孢屬的微生物都是優(yōu)勢(shì)菌群。而堆肥輔料的不同，并不明顯影響其中微生物的變化規(guī)律。不論是從堆肥的物理性狀還是化學(xué)指標(biāo)來(lái)看，堆體0～30天都快速經(jīng)過(guò)了完整的常規(guī)堆肥一次發(fā)酵過(guò)程。DGGE檢測(cè)表明這個(gè)過(guò)程中細(xì)菌的

4、微生物群落發(fā)生了很大的變化。堆體內(nèi)細(xì)菌群類(lèi)在堆肥期中總體呈振蕩下降，遞減趨勢(shì)。
　　 對(duì)堆肥中的優(yōu)勢(shì)菌群芽孢桿菌進(jìn)行了相關(guān)的研究，包括芽孢桿菌的分離，計(jì)數(shù)，初步生理生化鑒定和16SrRNA的核酸菌種鑒定。16SrRNA目前是進(jìn)行微生物菌種鑒定的主要方法和手段之一，它主要是以原核生物的核糖體小亞基上的16SrRNA中所包含的遺傳信息來(lái)進(jìn)行分類(lèi)和鑒定。
　　 在堆體中分離的7株芽孢桿菌中，通過(guò)形態(tài)特征，培養(yǎng)特性和生理生化指標(biāo)