泄?jié)峤舛痉綄冃越Y腸炎大鼠血清及腸粘膜EGF、NO、NOS的影響.pdf

1、目的：潰瘍性結腸炎(Ulcerative Colitis，UC)是一種病因不明的發(fā)生在結腸的慢性非特異性炎癥性疾病，多發(fā)生于遠端結腸，也可遍及全結腸，以糜爛、潰瘍?yōu)橹饕±碜兓?，以腹痛、腹瀉、粘液膿血便和里急后重為主要臨床表現。近年來，-隨著人們生活習慣和環(huán)境因素的改變，UC的發(fā)病率逐年升高，嚴重影響患者的學習、工作及生活。我們根據中醫(yī)“濁毒”理論及潰瘍性結腸炎病機，提出“泄?jié)嵘?，解毒祛瘀”之治療大法，選出經驗方泄?jié)峤舛痉?，通過動物實

2、驗，觀察泄?jié)峤舛痉綄冃越Y腸炎大鼠血清及腸粘膜EGF、NO、NOS的影響，并與柳氮磺胺吡啶進行療效比較，探討該方治療UC可能的作用機制，以期為UC的治療提供一定的理論及實踐依據。
　　方法：本研究采用三硝基苯磺酸(2，4，6-trinitrobenzene-sulfonicacid，TNBS)/乙醇聯(lián)合造模法誘導大鼠潰瘍性結腸炎動物模型，取健康清潔級wistar大鼠45只，體重220-250g，雄性，隨機抽取8只作為空白組(BG

3、)，其余大鼠由肛門推入含TNBS100mg/kg的30％乙醇溶液，復制潰瘍性結腸炎的動物模型。3天后，隨機抽取5只造模大鼠處死，取其結腸標本，病理檢查確認其有充血、水腫及典型潰瘍形成等一系列病理變化即為造模成功。將剩余造模大鼠隨機分為模型組(MG)、柳氮磺胺吡啶組(SG)、泄?jié)峤舛痉叫┝拷M(LG)、泄?jié)峤舛痉酱髣┝拷M(HG)4組，每組8只。BG、MG組用生理鹽水灌胃，SG、LG、HG組分別給予柳氮磺胺吡啶液0.3g/kg、泄?jié)峤舛痉剿?/p>

4、煎劑10.0g/kg、泄?jié)峤舛痉剿鍎?0.0g/kg灌胃，每日1次，連續(xù)治療14天，觀察其療效。實驗從3個方面進行研究探討：實驗一觀察泄?jié)峤舛痉綄C大鼠一般狀況及結腸組織病理學的影響。實驗二分別采用放射性免疫技術及免疫組化技術檢測泄?jié)峤舛痉綄C大鼠血清EGF含量及結腸組織EGF的表達。實驗三采用硝酸還原酶法檢測血清NO及結腸組織中NO含量；化學法檢測血清中NOS活性及NOS活性。采用SPSS13.0進行統(tǒng)計學分析，以P<0.05作

5、為有統(tǒng)計學意義的判定標準。
　　結果：⑴一般狀況：MG組及各治療組大鼠與BG組相比均有不同改變，HG組大鼠的精神狀態(tài)、毛發(fā)光澤度、反應情況、進食、體質量、大便性狀等情況均好于其它組，其中MG組情況最差。大鼠的疾病活動指數(DAI)評分：BG組大鼠DAI評分較低，MG組大鼠DAI評分顯著增高，兩組相比有顯著差異性(P<0.05)。HG組、LG組、SG組與MG組相比大鼠DAI評分均明顯降低，均有非常顯著性差異(P<0.05)。HG組與

6、SG組相比，大鼠DAI評分降低，有非常顯著性差異(P<0.05)；SG組與LG組相比，大鼠DAI評分無顯著性差異(P>0.05)。結腸粘膜損傷指數(CMDI)評分：BG組大鼠CMDI評分較低，MG組大鼠CMDI評分顯著增高，兩組相比有顯著差異性(P<0.05)。與MG組相比，SG組、LG組、HG組大鼠CMDI評分明顯降低，均有顯著性差異(P<0.05)。與SG組相比，HG組大鼠CMDI評分明顯降低，有顯蓍性差異(P<0.05)；LG組與

7、SG組大鼠CMDI評分相比，無顯著性差異(P>0.05)。光鏡下結腸病理組織觀察：BG組大鼠結腸組織全層結構清晰，無潰瘍、糜爛及充血，黏膜上皮細胞排列整齊，腸腺規(guī)則，杯狀細胞豐富，固有層可見毛細血管紋理；SG組與LG組結腸潰瘍較表淺，潰瘍旁上皮修復明顯，腺體增生活躍，隱窩、腸腺及間質可見少量炎性細胞浸潤；HG組結腸粘膜上皮及腺管排列整齊，腺體增生活躍，杯狀細胞豐富，間質充血水腫不明顯，隱窩、腸腺及間質可見炎性細胞浸潤，其基本形態(tài)與BG組

8、相似。⑵放射性免疫法測定大鼠血清EGF含量：MG組與BG緝相比，兩組血清EGF含量無顯著性差異(P>0.05)；SG組與MG組相比，血清EGF含量升高，經統(tǒng)計學處理有顯著性差異(P<0.05)。SG組與LG組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；HG組與SG組相比，血清EGF含量升高，差異有顯著性差異(P<0.05)；SG組與LG組相比，血清EGF含量升高，經統(tǒng)計學處理有顯著性差異(P<0.05)。免疫組織化學法測定大鼠結腸組織EGF

9、的表達：MG組與BG組相比，兩組結腸EGF表達無顯著性差異(P>0.05)；SG組與MG組相比，血清EGF含量升高，經統(tǒng)計學處理有顯著性差異(P<0.05)。柳氮磺胺吡啶組與泄?jié)峤舛痉叫┝拷M相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；泄?jié)峤舛痉酱髣┝拷M與柳氮磺胺吡啶組相比，血清EGF含量升高，差異有顯著性差異(P<0.05)。⑶用硝酸還原酶法及化學法檢測UC大鼠血清NO含量及NOS活性：MG組與BG組相比，其血清NO含量及NOS活性升高，

10、(P<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義：SG組與MG組相比，血清NO含量及NOS活性降低，差異有顯著性差異(P<0.05)。SG組與LG組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；HG組與SG組相比，血清NO含量及NOS活性降低，差異有統(tǒng)計學意義；(P<0.05)；HG組與LG組相比，血清NO含量及NOS活性降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。用硝酸還原酶法及化學法檢測UC大鼠結腸組織NO含量及NOS活性：BG組大鼠結腸組織NO含量及NO

11、S活性處于較低水平，MG組大鼠結腸組織NO含量及NOS活性顯著上升，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；SG組、LG組及HG組大鼠結腸組織NO含量及NOS活性較MG組相比，均降低，其中，HG組與MG組相比，大鼠結腸組織NO含量及NOS活性明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；LG組、SG組大鼠結腸組織NO含量及NOS活性與MG組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結論：泄?jié)峤舛痉侥芨纳茲冃越Y腸炎大鼠的一般狀況，降低