微型鈦網(wǎng)誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:運(yùn)用RT-PCR及掃描電鏡探討新型的微型鈦網(wǎng)(micro-TW，TW)支架材料誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow stromalcells，BMSCs)成骨分化的能力，以期為骨缺損修復(fù)重建提供良好的支架材料。
　　方法:采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法以及percoll液密度梯度離心法相結(jié)合，成功分離培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。通過(guò)成骨誘導(dǎo)分化及成脂誘導(dǎo)分化證明目的細(xì)胞具備多向分化能力，從而鑒定獲得的細(xì)胞為兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。取

2、第三代細(xì)胞接種于六孔板中，實(shí)驗(yàn)組加入微型鈦網(wǎng)支架+普通培養(yǎng)基，對(duì)照組加入成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基，空白組加入普通培養(yǎng)基，14 d后應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)、骨橋蛋白(OPN)、骨鈣素(OCN) mRNA的表達(dá)水平，以2^（-△△CT）法計(jì)算基因表達(dá)的相對(duì)比值，并通過(guò)掃描電鏡觀察細(xì)胞在微型鈦網(wǎng)支架上的長(zhǎng)入、粘附及形態(tài)。
　　結(jié)果: RT-PCR檢測(cè)出實(shí)驗(yàn)組堿性磷酸酶(ALP)、骨橋蛋白(OPN)、骨鈣素(OCN) mRNA

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