肝癌中醫(yī)證候分型與CyclinB1基因、AFP表達相關(guān)性實驗研究.pdf

1、目的:本研究通過肝癌患者臨床資料及病理組織標本的收集，認識細胞周期蛋白B1(Cyclin B1)及甲胎蛋白(AFP)在原發(fā)性肝癌各中醫(yī)證候分型中表達的高低及組間差異的關(guān)聯(lián)性，探討祖國醫(yī)學證候理論的實質(zhì)，為原發(fā)性肝細胞癌中醫(yī)癥候提供細胞分子生物學理論基礎;開展國內(nèi)肝癌“中醫(yī)癥候”←→“基因研究”，獲得原發(fā)性肝癌四種常見中醫(yī)癥候的基因表達特征譜，開辟肝癌中醫(yī)“證”的基因診斷方法，提高原發(fā)性肝癌的中醫(yī)診療水平及對疾病轉(zhuǎn)歸、預后的預測能力。

2、r>　　方法:本實驗通過臨床收集2013年10月-2015年1月就診于西安交通大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院肝膽外科、腫瘤外科及陜西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院外二科住院的92例肝癌患者，運用中醫(yī)學整體觀念、辨證論治理論，劃分為濕熱蘊毒證、肝郁脾虛證、血瘀毒結(jié)證及肝腎陰虧，熱毒瘀滯證四種常見證型類型。手術(shù)切除或肝穿刺活檢肝癌組織離體后放置10％福爾馬林溶液中，石蠟包埋存檔蠟塊于西安交通大學第一附屬醫(yī)院及陜西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院病理科。電子顯微鏡下觀察肝癌細

3、胞的分化程度、免疫組化法測定肝癌組織中CyclinB1基因的表達水平、酶聯(lián)免疫法測定各組患者血清中AFP含量，測定所有入組患者的肝功能、凝血功能等生化檢查及影像學檢查。
　　結(jié)果:①患者肝癌組織中CyclinB1基因表達水平及血清AFP蛋白含量各證候間存在顯著差異，共同參與原發(fā)性肝癌的發(fā)生、發(fā)展及預后。兩者的表達水平可作為評估原發(fā)性肝癌進展、轉(zhuǎn)歸及預后的重要指標。(P＜0.01)。②肝癌組織中CyclinB1基因在各中醫(yī)證候中表達

4、由高到低為:濕熱蘊毒證＞肝腎陰虧，熱毒瘀滯證＞血瘀毒結(jié)證＞肝郁脾虛證＞癌旁正常肝組織組(P＜0.01)。③肝癌患者血清AFP含量各中醫(yī)證候中由高到低結(jié)果為:濕熱蘊毒證＞肝腎陰虧，熱毒瘀滯證＞血瘀毒結(jié)證＞肝郁脾虛證。(P＜0.01)。④肝癌組織中CyclinB1基因表達及血清AFP含量在肝癌發(fā)生、發(fā)展中具有協(xié)同作用，其相關(guān)性分析顯示:CyclinB1基因表達水平及血清AFP含量在肝郁脾虛證、肝腎陰虧，熱毒瘀滯證、濕熱蘊毒證、血瘀毒結(jié)證相關(guān)

5、系數(shù)分別為:0.873、0.869、0.882及0.869，具有顯著相關(guān)性，表明Cyc1inB1基因及AFP對原發(fā)性肝細胞癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸及預后具有一定的協(xié)同作用。⑤研究結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌患者肝癌組織中CyclinB1基因、血清AFP含量在肝癌實證中高表達，在肝癌虛證中表達相對較低，其機制有待進二步研究。
　　結(jié)論:肝癌組織中CyclinB1基因表達水平明顯高于癌旁正常肝組織;CyclinB1基因表達水平與肝癌患者血清AFP含