復(fù)方中藥丹益蓮的成分分析及抗動脈粥樣硬化作用研究.pdf

1、目的：
　　分析復(fù)方中藥丹益蓮的主要有效成分，為將來質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。研究丹益蓮的降血脂和抗動脈粥樣硬化作用，并初步考察其作用機理。研究丹益蓮的急性毒性，從而在動物水平上評價其安全性。
　　方法：
　　1. HPLC同時測定復(fù)方中藥丹益蓮中的5種活性成分。
　　2.采用VD3聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)的方法建立動脈粥樣硬化（AS）大鼠模型，隨機分為模型組（C）、丹益蓮高劑量給藥組（H）、丹益蓮中劑量給藥組（M）、丹益

2、蓮低劑量給藥組（L）、辛伐他?。栃运幬铮┙o藥組（P），將普通飼料喂養(yǎng)的大鼠設(shè)為正常對照組(N)。藥物干預(yù)6周后取血，檢測血脂水平；處死，留取動脈和肝臟，測定引發(fā)動脈粥樣硬化的各項指標(biāo)。
　　3. ELISA方法測定血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、載脂蛋白A（apo-A）、載脂蛋白B（apo-B）含量；TBA方法測定肝臟勻漿中丙二醛（MDA）含量；ELISA方法測定動脈勻漿

3、中細(xì)胞間粘附因子-1（ICAM-1）、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（ MCP-1）含量；免疫組化方法測定動脈切片中血管細(xì)胞粘附分子-1（VCAM-1）、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達。
　　4.急性毒理學(xué)實驗采用昆明小鼠雌雄各半，給藥組使用藥物可制備的最大濃度及小鼠能耐受的最大容積，一日內(nèi)灌胃3次。
　　結(jié)果：
　　1. HPLC活性成分分析表明，復(fù)方中藥丹益蓮中丹參素鈉、紅景天苷、毛蕊異黃酮苷、丹酚酸B、甘草酸含量分別為

4、39.35μg/ml、30.67μg/ml、0.32μg/ml、342.00μg/ml、1.42μg/ml。
　　2.與正常組相比，模型組血清中TC、TG、LDL、apo-B含量顯著升高（p<0.01）， HDL、apo-A含量顯著降低(p<0.01)；肝臟組織中MDA含量顯著性增加（p<0.05）；動脈組織中ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、TNF-α等致動脈粥樣硬化因子的表達量均顯著性增高(p<0.01)。
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5、.與模型組相比，各給藥組均可顯著降低血清中TC、TG、LDL、apo-B含量，升高HDL、apo-A含量；顯著性降低肝臟勻漿中MDA含量，H組、M組、L組組間計較表明呈劑量依賴性；顯著性降低動脈組織勻漿中ICAM-1及MCP-1的含量；顯著性降低動脈切片VCAM-1、TNF-α的表達，且呈劑量依賴性。
　　4.14日小鼠急毒實驗結(jié)束后，將各組小鼠解剖、肉眼觀察主要臟器均未見明顯改變，測得丹益蓮最大耐受量為193.8 g/kg，相當(dāng)

6、于臨床日用量的172倍。
　　結(jié)論：
　　1.丹參素鈉、紅景天苷、毛蕊異黃酮苷、丹酚酸 B、甘草酸為丹益蓮的有效成分。
　　2.模型組出現(xiàn)血脂代謝紊亂，動脈中各誘導(dǎo)動脈粥樣硬化發(fā)生的炎性因子表達量顯著性增加，大鼠動脈粥樣硬化模型構(gòu)建成功。
　　3.丹益蓮及陽性對照藥辛伐他汀可顯著降低血清中 TC、TG、LDL、apo-B含量，升高HDL、apo-A含量，具有較好的降血脂作用；肝臟中MDA含量劑量依賴性降低，減少肝