附子現(xiàn)代炮制品的急性毒性及藥效學(xué)評(píng)價(jià)研究.pdf

1、目的:
　　附子首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有回陽(yáng)救逆，補(bǔ)火助陽(yáng)，散寒止痛的功效。但是附子本身具有毒性，需要經(jīng)過(guò)炮制后方可入藥。研究表明，傳統(tǒng)炮制方法操作繁瑣，炮制周期較長(zhǎng)，且炮制過(guò)程中有效成分損失嚴(yán)重，質(zhì)量參差不齊，難以保證藥材質(zhì)量的穩(wěn)定性。
　　課題組前期結(jié)合飲片生產(chǎn)需要，已對(duì)附子高壓蒸制工藝、高溫烘制工藝和微波炮制工藝進(jìn)行了深入的研究，從化學(xué)成分上確定了其最佳炮制工藝。但新型炮制工藝能否完全取代傳統(tǒng)的炮制工藝，為了確保其科

2、學(xué)性，本項(xiàng)目將進(jìn)一步從毒理學(xué)與藥效學(xué)的層面，綜合評(píng)價(jià)附子現(xiàn)代炮制工藝的安全性和有效性。
　　方法:
　　1.文獻(xiàn)資料的研究
　　對(duì)附子的炮制工藝、毒理學(xué)、藥理學(xué)作用等方面進(jìn)行總結(jié)與分析，為制定可行的實(shí)驗(yàn)方案提供參考。
　　2.附子不同炮制品及其煎煮液的含量測(cè)定
　　采用課題組前期所優(yōu)選出來(lái)的高溫、高壓、微波炮制工藝及黑順片的炮制工藝對(duì)同一批次的附子藥材進(jìn)行炮制。通過(guò)HPLC法分別測(cè)定附子藥材及其炮制品以及炮

3、制品煎煮液中6種主要生物堿的含量。
　　3.附子不同炮制品煎煮液的急性毒性研究
　　通過(guò)急毒實(shí)驗(yàn)對(duì)附子4種炮制品進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。
　　4.小鼠陽(yáng)虛模型的建立及回陽(yáng)救逆實(shí)驗(yàn)研究
　　采用氫化可的松進(jìn)行陽(yáng)虛造模，造模成功后給予4種炮制品的不同濃度的煎煮液，評(píng)價(jià)其對(duì)于陽(yáng)虛小鼠“回陽(yáng)救逆”的作用。
　　5.附子不同炮制品煎煮液對(duì)陽(yáng)虛小鼠耳廓微循環(huán)的作用研究
　　采用氫化可的松進(jìn)行陽(yáng)虛造模，同時(shí)給予4種炮制品的

4、不同濃度的煎煮液，評(píng)價(jià)其對(duì)于陽(yáng)虛小鼠耳廓微循環(huán)的作用。
　　6.附子不同炮制品煎煮液對(duì)離體大鼠心臟強(qiáng)心作用的比較
　　采用Langendorff法進(jìn)行大鼠離體心臟灌流，給予4種炮制品的不同濃度的煎煮液，對(duì)HR、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax進(jìn)行測(cè)定。
　　結(jié)果:
　　1.含量測(cè)定結(jié)果表明，6種主要生物堿總含量及總生物堿含量高壓片（簡(jiǎn)稱:GY）＞黑順片（簡(jiǎn)稱:H）＞高溫片（簡(jiǎn)稱:GW）＞微波片（簡(jiǎn)稱:WB

5、）。
　　2.急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)四種炮制品煎煮液的最大給藥劑量為48g生藥·kg-1，相當(dāng)于臨床成人日劑量(15g·60kg-1)的192倍，無(wú)動(dòng)物死亡。
　　3.回陽(yáng)救逆實(shí)驗(yàn)表明，與模型組小鼠血漿比較，附子4種炮制品煎煮液組均能使陽(yáng)虛小鼠血漿ET、c-GMP含量降低，c-AMP/c-GMP、c-AMP含量升高，同時(shí)能增加脾臟、胸腺的質(zhì)量指數(shù)，具有顯著性差異。在0.75-7.04g/kg濃度范圍內(nèi)劑量與ET、c-GMP

6、、c-AMP、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)分別呈良好的線性關(guān)系，且各給藥組小鼠各種指標(biāo)均無(wú)明顯差異。
　　4.附子4種炮制品煎煮液組小鼠與模型組小鼠相比，均能擴(kuò)大毛細(xì)血管管徑，增加毛細(xì)血管網(wǎng)交叉點(diǎn)數(shù)。且在0.75-5.63g/kg濃度范圍內(nèi)，隨著劑量的增大，給藥組小鼠毛細(xì)血管網(wǎng)管徑及交叉點(diǎn)數(shù)與模型組小鼠相比差異逐漸增大。
　　5.附子4種炮制品煎煮液組在0.75-7.04g/kg的濃度范圍內(nèi)均能使離體大鼠心臟的HR、LVSP的值顯著提

7、高，降低LVEDP，增大±dp/dtmax，強(qiáng)心作用明顯，且劑量和HR、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax呈良好的線性關(guān)系，同時(shí)附子4種炮制品組對(duì)心臟各指標(biāo)的作用無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論:
　　研究表明，附子3種新型炮制品煎煮液，在急毒實(shí)驗(yàn)及回陽(yáng)救逆、回陽(yáng)通脈、強(qiáng)心作用方面與傳統(tǒng)炮制工藝黑順片煎煮液的作用無(wú)明顯差異，說(shuō)明這3種新型炮制工藝的附子炮制品是安全有效的。同時(shí)高壓片在回陽(yáng)救逆方面與黑順片作用基本相當(dāng)，但高壓片的