益心康對(duì)感染柯薩奇病毒B3的體外心肌細(xì)胞的影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過(guò)建立體外病毒性心肌炎(VMC)細(xì)胞模型，研究益心康作用于體外感染柯薩奇B3病毒的心肌細(xì)胞，對(duì)細(xì)胞搏動(dòng)、形態(tài)、酶學(xué)及生物細(xì)胞因子的影響，為中藥復(fù)方益心康的進(jìn)一步臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:采用消化法培養(yǎng)原代乳鼠心肌細(xì)胞，鏡下觀察心肌細(xì)胞形態(tài)及搏動(dòng)次數(shù)；在細(xì)胞水平測(cè)定病毒滴度以及益心康的最大無(wú)毒劑量；以CVB3感染心肌細(xì)胞建立病毒性心肌炎細(xì)胞模型；分組給予利巴韋林、中藥、中藥混合地塞米松藥物，用Elisa法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組

2、心肌細(xì)胞的心肌酶AST、LDH的水平；用RT-PCR法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞中的柯薩奇病毒基因表達(dá)水平、腫瘤壞死因子（TNF-α）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)水平。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:鏡下觀察各組細(xì)胞感染病毒并給藥48小時(shí)后的細(xì)胞搏動(dòng)，形態(tài)及病變情況表明，組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，多重比較示，益心康組細(xì)胞的搏動(dòng)明顯增多，細(xì)胞病變輕于病毒組及利巴韋林組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 Elisa實(shí)驗(yàn)測(cè)定各組細(xì)胞給藥48小時(shí)后的酶學(xué)水平數(shù)值表示，

3、組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。多重比較示，益心康組細(xì)胞給藥48小時(shí)后的酶學(xué)水平(AST、LDH)較病毒組和利巴韋林組顯著降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。益心康組細(xì)胞和益心康混合地塞米松組細(xì)胞給藥48小時(shí)后的酶學(xué)水平相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 PCR實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)表明各組細(xì)胞中的病毒復(fù)制水平及細(xì)胞因子(TNF-α、TGFβ)組間比較有組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。多重比較示，益心康組細(xì)胞益心康還可明顯抑制心肌細(xì)胞內(nèi)的病毒復(fù)制；并且TNF-α及TGF-的分泌明顯低于病毒組，