納米銀-脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的制備及抗菌性能評價.pdf

1、[目的]1.探究納米銀溶液的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度，進(jìn)而對納米銀的抗菌性能進(jìn)行評價;2.將脫細(xì)胞真皮基質(zhì)與納米銀結(jié)合，制作一種兼具抗感染作用和促進(jìn)創(chuàng)面組織再生作用的生物敷料。3.體外實驗評價納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的抗菌殺菌效果。4.體外實驗評價納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)中銀的緩釋性能，評價納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的抗菌殺菌效果的持久性。5.探究一種簡單可靠的動物燙傷模型，對不同深度的燙傷模型實驗條件進(jìn)行探索。6.制作大鼠深Ⅱ°燙傷后感染動

2、物模型，評價納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的抗感染和促進(jìn)愈合的綜合作用。
　　 [方法]1.通過倍比稀釋法和基內(nèi)接種法，測定了納米銀溶液對于金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度。2.通過浸漬吸附法將納米銀與脫細(xì)胞真皮基質(zhì)結(jié)合，制備納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)。3.通過Kirby-Baucer抑菌環(huán)法比較不同濃度浸漬的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的抑菌效果，進(jìn)而評價納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的體外抗菌效果。4.通過血漿浸漬法模仿創(chuàng)面滲出，檢測

3、浸漬不同時間后的納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)及血漿中納米銀含量，同時對浸漬后的納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)進(jìn)行Kirby-Baucer抑菌環(huán)實驗，評價其緩釋性能。5.通過砝碼燙傷法探究大鼠不同深度燙傷的實驗條件，病理切片證實90℃燙傷15s可造成大鼠深Ⅱ°燙傷。應(yīng)用創(chuàng)面定量涂菌法制備大鼠深Ⅱ°燙傷后創(chuàng)面感染動物模型，通過分組使用“醫(yī)用紗布”、“愛可欣”、“脫細(xì)胞真皮基質(zhì)”、“納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)”，觀察使用不同敷料換藥創(chuàng)面痂下細(xì)菌計數(shù)、創(chuàng)面愈合率

4、、愈合等級、愈合天數(shù)四個指標(biāo)，進(jìn)一步評價了納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的臨床抗感染和促進(jìn)創(chuàng)面愈合效果。
　　 [結(jié)果]1.納米銀溶液對于金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度均為為8mg/L;納米銀溶液對于金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌的最低殺菌濃度分別為64mg/L和32mg/L;納米銀對于銅綠假單胞菌的殺菌效果可能優(yōu)于金黃色葡萄球菌。2.浸漬納米銀溶液48h后制備出納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)敷料，保留了脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的柔軟和彈性，電

5、鏡觀察其表面和內(nèi)部均勻分布有大小均一的納米銀顆粒。3.相同的浸漬時間內(nèi)，隨著浸漬納米銀濃度的升高，所得的納米銀脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的抑菌環(huán)逐漸增大:對于銅綠假單胞菌組，當(dāng)浸漬濃度為7.8125mg/L及更高濃度組時納米銀脫細(xì)胞真皮基質(zhì)組的抑菌環(huán)直徑將大于愛可欣組的抑菌環(huán)直徑，即抑菌效果優(yōu)于愛可欣;對于金黃色葡萄球菌，當(dāng)浸漬濃度為15.625mg/L及更高濃度時納米銀脫細(xì)胞真皮基質(zhì)組的抑菌環(huán)直徑將大于愛可欣組的抑菌環(huán)直徑，即抑菌效果優(yōu)于愛可欣。

6、4.愛可欣及納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)均能快速釋放納米銀，且納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)釋放速度快于愛可欣，浸漬5天后仍有較快的釋放速度。5.對于金黃色葡萄球菌組，納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)血漿中浸漬天數(shù)≤3天時，抗菌效果不遜于愛可欣;對于銅綠假單胞菌組，納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)血漿中浸漬天數(shù)≤5天時，抗菌效果仍不遜于愛可欣。6.通過砝碼燙傷制作出穩(wěn)定的大鼠燙傷模型:60℃(5s)、60℃(15s)、70℃(10s)、80℃(15s)、90℃(15s)

7、、100℃(15s)對應(yīng)大鼠Ⅰ°、淺Ⅱ°、淺Ⅱ°、偏淺深Ⅱ°、偏深深Ⅱ°、Ⅲ°創(chuàng)面。7.制備出大鼠深Ⅱ°燙傷伴感染模型，納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)在創(chuàng)面痂下細(xì)菌計數(shù)、創(chuàng)面愈合率、愈合等級、愈合天數(shù)四個指標(biāo)中均優(yōu)于愛可欣、脫細(xì)胞真皮基質(zhì)、醫(yī)用紗布，進(jìn)一步驗證了納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的臨床抗感染和促進(jìn)創(chuàng)面愈合效果。
　　 [結(jié)論]1.納米銀具有良好的抗菌作用。2.浸漬吸附法可用于制備納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)。3.納米銀/脫細(xì)胞真皮基質(zhì)具有