AcSDKP對體外培養(yǎng)條件下小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞生長的影響.pdf_第1頁
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1、湖南師范大學碩士學位論文AcSDKP對體外培養(yǎng)條件下小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞生長的影響姓名:李燁申請學位級別:碩士專業(yè):生理學指導教師:汪保和20040401摘要N一乙酰一絲一天冬一賴一脯氨酸(AcSDKP)是一種生理性調(diào)節(jié)因子,它抑制造血干/祖細胞和其它細胞的增殖。該小分子肽能阻止細胞進入S期,使之滯留在G。/G1期。這種抑制作用是完全可逆和非毒性的。骨髓闖充質(zhì)干細胞(MSC)被認為是骨和骨髓內(nèi)幾種細胞譜系的共同前體細胞,這些譜系包括成骨

2、細胞、軟骨細胞、脂肪細胞和造血支持基質(zhì)。骨髓Msc本身也參與了造血微環(huán)境的組成及功能。本文的工作假說是AcSDKP對MSc的生長可能有調(diào)節(jié)作用。我們進行體外細胞克隆試驗和采用有關(guān)實驗技術(shù),研究了AcSD時對小鼠骨髓MSC生長的影Ⅱ向。本研究所獲結(jié)果為我們的假說提供了支持。體外培養(yǎng)條件下,AcSDKP使小鼠骨髓MSC集落的生成數(shù)和大小顯著減小;最大效應濃度為lxl0_12mol/L,無論其濃度下降或上升,效應都減低;在濃度Nlxl0叫om

3、ol/L干1]1x10“4mol/L時,抑制效應明顯減弱或消失:量效關(guān)系曲線是雙相的。四甲基偶氮唑鹽法(MTT法)的檢測結(jié)果進一步證明了AcSDKP能劑量依賴性地抑制小鼠骨髓MSC的生長。AcSDKP在同樣的MSC培養(yǎng)體系中作用72h被撤除后,MSC集落數(shù)明顯恢復,隨著AcSDKP的作用時間縮短而MSC集落數(shù)恢復程度增加,說明AcSDKP對MSC生長的抑制作用是可逆的。然而,即使作用時間縮短至12h集落數(shù)仍明顯少于不加AcSDKP對照組

4、,意味著該四肽因子可能對MSC的貼壁能力有抑制作用。在血清濃度為10%~30%的培養(yǎng)條件下,AcSDKP顯著減少MSC集落生成數(shù),但血清濃度為40%時沒有這樣的效應,這提示AcsDKP能阻斷血清所含細胞生長刺激因子的作用,而抑帛OMSC集落的生成??傊狙芯渴状潍@得AcSDKP在體外培養(yǎng)條件下抑制骨髓MSC生長的實驗結(jié)果,并且這種抑制效應具有雙相的劑量依賴性、時間依賴性以及可逆性。AcSDKP阻斷細胞生長刺激因子的作用可能是其抑制骨髓

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