阿托伐他汀對大鼠腎缺血再灌注損傷中TLR4的影響.pdf

1、目的：通過觀察阿托伐他汀對大鼠腎缺血再灌注損傷中TLR4、NF-κBp65及IL-6表達的影響，從而探討阿托伐他汀的腎臟保護作用，為臨床防治腎IRI提供實驗性理論依據。
　　 方法：雄性wistar大鼠54只隨機分為假手術組（sham組）、手術組（Ir組）、干預組（A組），每組18只大鼠，按取材時間不同（6h、24h、48h）每組又分為三個時相組，每時相組6只大鼠。手術方法：sham組：打開大鼠腹腔，分離雙側腎動脈但不夾閉，后關

2、閉腹腔。Ir組：打開大鼠腹腔，用無創(chuàng)動脈夾夾閉大鼠雙側腎動脈45min后恢復灌注，制成腎IRI 模型；A組：術前灌胃阿托伐他汀鈣片10mg ﹒kg-1﹒day-1，連續(xù)7天，其余處理同Ir組。再灌注達相應時間點時，檢測Scr、血膽固醇以及進行腎組織病理學觀察并采用免疫組織化法測定TLR4、NF-κBp65及IL-6蛋白的表達水平。
　　 結果：
　　 1.光鏡下觀察HE 染色標本，sham組：腎組織形態(tài)結構清晰，小管上皮

3、細胞完整且整齊排列，管腔無擴張，內可見刷狀緣、無管型，間質無充血、水腫及炎細胞浸潤；Ir組：腎小球結構無明顯變化，腎小管上皮細胞有不同程度的腫脹、壞死和脫落、排列紊亂，刷狀緣消失，管腔擴張，可見管型，腎間質水腫、炎細胞浸潤明顯，尤以24h 較重；A組：腎小球無明顯的結構異常，腎小管上皮細胞腫脹、壞死及腎間質的水腫、炎性細胞的浸潤程度較Ir組各時間點明顯減輕。
　　 2.sham組中，Scr 維持在正常范圍內（6h：39.16±1

4、.98，24h：43.51±1.92，48h：42.26±2.43）；Ir組中，Scr水平在6h時開始明顯升高（110.53±10.49），24h達到高峰（210.25±17.94），48h時有所下降（187.81±14.96）,但仍維持在較高水平；Ir組各時項組較sham組Scr水平差異有顯著性(P＜0.01）；A組中，各時項組Scr水平較Ir組明顯下降(6h：84.88±13.14，24h：175.91±12.18，48h：156.

5、80±10.71)差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但仍維持在較高水平。
　　 3．在相應時間點，A組大鼠的血總膽固醇水平較sham組差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 4.sham組中，腎組織中TLR4表達較弱（6h:0.90±0.84，24h：1.60±0.55，48h：1.00±0.70）。Ir組再灌注6h后TLR4表達開始增強（6h：102.20±14.24），主要表達于腎小管上皮細胞胞漿內，24h后除小管受累

6、外多部位均廣泛表達（24h：182.40±14.36），48h時表達有所減弱（48h：160.40±15.90），與sham組相比差異有顯著性（P＜0.01）。A組各時相組TLR4表達水平較Ir組減弱(6h：77.80±10.08，24h：143.40±11.97，48h：127.60±12.88)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但仍維持在較高水平。
　　 5．Sham組中，腎組織中IL-6表達較弱（6h:1.00±0.71

7、，24h：1.40±0.89，48h：1.40±0.55）。Ir組再灌注6h后IL-6表達開始上調（6h：107.00±13.69），主要表達于腎小管上皮細胞胞漿內，24h時IL-6表達至高峰（24h：183.00±11.18），48h時表達有所減弱（48h：167.00±15.13），與sham組相比差異有顯著性（P＜0.01）。A組各時相組IL-6表達水平較Ir組減弱(6h：79.60±10.50，24h：147.40±13.05，

8、48h：131.80±10.01)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但仍維持在較高水平。
　　 6.sham組中，腎組織中NF-κBp65表達較弱（6h:1.20±0.45，24h：1.80±0.45，48h：1.40±0.55）。Ir組再灌注6h后NF-κBp65表達開始增強（6h：92.40±15.52），主要表達于腎小管上皮細胞胞漿內和（或）核內，24h表達至高峰（24h：169.80±15.00），48h時表達有所回落

9、（48h：149.00±15.28），與sham組相比差異有顯著性（P＜0.01）。A組各時相組NF-κBp65表達水平較Ir組減弱(6h：64.20±12.40，24h：135.20±17.00，48h：116.40±17.01)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但其表達仍強于sham組。
　　 結論：
　　 1.夾閉雙腎動脈45min后恢復灌注，可見腎組織明顯的病理變化，尤以腎小管損傷為重，且腎功能受損，IRI 造

10、模成功。
　　 2.IRI后，TLR4、NF-κBp65及IL-6的表達明顯上調，缺血再灌注可能通過TLR4信號途徑導致NF-κBp65 激活，從而激發(fā)缺血再灌注后炎癥反應的發(fā)生。
　　 3.給予阿托伐他汀預處理，可以使腎IRI 程度減輕，Scr水平明顯下降，腎功能得到改善；同時使TLR4、NF-κBp65及IL-6的蛋白表達顯著下調，而血脂較sham組差異無顯著性。阿托伐他汀可能通過抑制TLR4信號途徑，發(fā)揮其非依賴降