核基質形態(tài)及蛋白表達在HMBA誘導人肝癌SMMC-7721細胞分化過程中的變化研究.pdf

1、細胞核基質以及核基質蛋白在細胞生命活動中起著重要的作用，本研究以腫瘤細胞核基質為研究對象，通過高分辨率雙向凝膠電泳分離分析及MALDI-TOF-MS肽指紋(PMF)鑒定技術結合蛋白質數(shù)據(jù)庫查詢的方法，對環(huán)六亞甲基雙乙酰胺(hexamethylenebisacetamide，HMBA)誘導分化處理前后人肝癌SMMC-7721細胞核基質抽提物進行差異蛋白質組分析。鑒定與肝癌細胞相關的特異核基質蛋白，并初步探索它們的表達變化在腫瘤細胞誘導分化

2、中的調節(jié)作用，為進一步深入研究腫瘤細胞惡性增殖與逆轉之間的機理提供理論依據(jù)。 經(jīng)5mMHMBA處理后，人肝癌SMMC-7721細胞出現(xiàn)了明顯的誘導分化效應；細胞增殖受到抑制，細胞周期在G1/S期的阻滯顯著，且細胞超微結構形態(tài)的惡性表型出現(xiàn)恢復性變化。選擇性抽提結合整裝電鏡樣品制備技術顯示細胞核基質-中間纖維構型由腫瘤細胞核基質常見的粗細長短不規(guī)則積聚的纖維結構轉變?yōu)閷哟畏置?、精細發(fā)達的交織網(wǎng)狀結構。經(jīng)HMBA處理后人肝癌細胞差

3、異表達的核基質蛋白質可分別在轉錄水平、轉錄后加工水平以及翻譯水平對基因表達起重要的調控作用，包括一些轉錄因子或輔因子：抑制Myc的轉錄活性的SIN3B蛋白，類TFIIH基礎轉錄因子復合物p44亞基，與腫瘤發(fā)生相關的myc、p53、pRB以及NF-KB、HDMs、ARF等多種轉錄因子相互作用的nucleophosmin；mRNA選擇性剪接因子SFRS1蛋白；以及在核糖體生物合成以及翻譯相關的p27BBP/eIF6、LBP。其中SFRS1是

4、新出現(xiàn)的蛋白質。 這些研究結果表明，HMBA通過干預肝癌細胞在轉錄水平以及轉錄后加工水平上的調控，下調誘發(fā)腫瘤惡性增殖的轉錄因子和核糖體的生物合成，抑制腫瘤功能相關的特異性蛋白質合成，來達到抑制腫瘤細胞生長的目的。并通過參與調節(jié)多種癌基因、抑癌基因的表達及其產(chǎn)物的活性，與信號轉導通路中多個環(huán)節(jié)的成員之間相互作用從而逆轉肝癌細胞的惡性增殖。證明了細胞增殖分化相關的特異核基質蛋白在腫瘤誘導分化及增殖調控中起重要作用，為進一步探索這