非酒精性脂肪肝和藥物對小鼠CYP2A5表達的影響.pdf

1、近年來，由于脂肪、高糖、激素類食品等攝入增加，使人類非酒精性脂肪肝（Non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD）發(fā)病率逐年增高，發(fā)病呈低齡化，并成為引發(fā)肝硬化、肝癌的重要病因；NAFLD也是動物原發(fā)或繼發(fā)性疾病，不僅給養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失，而且隨著病畜進入食品，加工品等流通市場，通過生物鏈又將直接或間接對人類造成危害。NAFLD已成為全球共同關注的社會健康和食品安全問題。目前國內(nèi)外用于防治NAFLD的

2、有效藥物較少。
　　 以往對于NAFLD研究成果發(fā)現(xiàn)NAFLD的發(fā)生發(fā)展與細胞色素P450（CytochromeP450，CYP450）之間存在著一定的聯(lián)系。CYP450是生物體內(nèi)主要的Ⅰ相代謝酶，包含許多同工酶，鼠類細胞色素P4502A5（CYP2A5）是CYP450中一個重要的成員，其活性受到眾多因素的影響，在疾病的發(fā)生發(fā)展過程中不同于其他CYP450酶而呈現(xiàn)獨特的增量調(diào)節(jié)作用。同時CYP2A5與人類的CYP2A6是起源相同

3、的代謝酶，各自在不同的物種中擔任著相似的功能，在外源性藥物和結構不同的前致癌物激活以及疾病的發(fā)生發(fā)展過程中均發(fā)揮了重要的作用。鼠類CYP2A5非常適合作為人類CYP2A6的模型。食物、環(huán)境或疾病等均會影響CYP2A5/CYP2A6的表達。因此通過對CYP2A5的研究可以進一步了解NAFLD發(fā)生發(fā)展的分子機制，以及在NAFLD情況下各種藥理通路以及作用靶位，為開發(fā)和研制防治NAFLD的新型獸藥提供科學的理論依據(jù)，同時對于預防人類肝臟相關性

4、疾病和癌癥，指導人類臨床合理用藥意義重大。目前，關于非酒精性脂肪肝對CYP2A5表達的影響，以及非酒精性脂肪肝與藥物對CYP2A5是否有協(xié)同作用等均未見報道。
　　 本課題將以人工誘發(fā)NAFLD模型的C57BL/6小鼠為試驗動物，從蛋白、酶活性和mRNA水平研究NAFLD對CYP2A5表達的影響，并且探討NAFLD與吡唑、苯巴比妥鈉兩種CYP2A5特殊誘導劑共同作用引起的CYP2A5的變化，旨在揭示CYP2A5在NAFLD造成的

5、肝損傷及其與吡唑、苯巴比妥鈉共同作用時，其基因表達的情況。結果發(fā)現(xiàn)：
　　 1.毗唑、苯巴比妥鈉誘導下，C57BL/6小鼠肝臟CYP2A5蛋白水平，酶活性和CYP2A5mRNA均較對照組增加，差異極顯著（P<0.01），說明藥物增加CYP2A5表達。
　　 2.NAFLD情況下，C57BL/6小鼠肝臟CYP2A5蛋白水平，酶活性和CYP2A5mRNA均較對照組增加，說明CYP2A5在NAFLD狀態(tài)下呈增量調(diào)節(jié)，參與NAF

6、LD的發(fā)生發(fā)展。
　　 3.NAFLD聯(lián)合吡唑、苯巴比妥鈉誘導，C57BL/6小鼠肝臟CYP2A5蛋白水平，酶活性和CYP2A5mRNA均較對照組極顯著增加（P<0.01），較NAFLD單純誘導和藥物單純誘導增加，且差異極顯著（P<0.01），說明二者有協(xié)同作用。
　　 本試驗初步發(fā)現(xiàn)NAFLD對C57BL/6小鼠肝臟CYP2A5呈現(xiàn)增量調(diào)節(jié)機制，同時與吡唑和苯巴比妥鈉協(xié)同性增加CYP2A5的表達，這一發(fā)現(xiàn)將為繼續(xù)研究C