黏菌素神經(jīng)毒性小鼠模型建立、機(jī)制探討及NGF保護(hù)作用.pdf

1、近10年來(lái)，黏菌素是目前臨床治療多重耐藥細(xì)菌感染的最有效藥物之一，臨床應(yīng)用持續(xù)增加，常常被作為臨床重癥患者的最后一線治療希望。神經(jīng)毒性是黏菌素臨床應(yīng)用的主要副作用之一，嚴(yán)重制約著其最佳療效，但神經(jīng)毒性的機(jī)制目前尚不清楚。因此，明確其毒性機(jī)制為尋找新的減毒措施指導(dǎo)臨床用藥具有重要意義，倍受國(guó)內(nèi)外關(guān)注。本文通過(guò)模擬臨床給藥，靜脈注射硫酸黏菌素，利用多重評(píng)價(jià)方式，建立小鼠神經(jīng)毒性模型，探討線粒體氧化應(yīng)激介導(dǎo)的黏菌素神經(jīng)毒性作用機(jī)制及外源性神經(jīng)

2、生長(zhǎng)因子(NGF)對(duì)黏菌素神經(jīng)毒性的保護(hù)作用。
　　 昆明系雌性小鼠18～22 g，隨機(jī)分為高、中、低三個(gè)劑量組和生理鹽水對(duì)照組，分別通過(guò)靜脈注射給予黏菌素15、7.5、5.0 mg/kg和生理鹽水，連續(xù)給藥7d。以給藥當(dāng)天為第0d，分別于給藥后第1、3、7、15d進(jìn)行了一般毒性評(píng)價(jià)、神經(jīng)行為學(xué)組合測(cè)試（自發(fā)活動(dòng)能力、感覺(jué)功能及運(yùn)動(dòng)功能）、神經(jīng)電生理測(cè)試（M波參數(shù)、F波參數(shù)及EMG測(cè)試）、神經(jīng)形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)（光學(xué)病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)觀察

3、）、氧化-抗氧化系統(tǒng)生相關(guān)生化指標(biāo)測(cè)定、凋亡相關(guān)因子表達(dá)及含量（caspase-9和3）檢測(cè)、NGF含量及相關(guān)受體表達(dá)（TrkA及p75NTR）檢測(cè);在此基礎(chǔ)上，設(shè)立對(duì)照組（0.9％氯化鈉）、黏菌素模型組（硫酸黏菌素15 mg/kg）、NGF保護(hù)組(硫酸黏菌素15 mg/kg+36μg/kg)，連續(xù)給藥7d后進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)、神經(jīng)電生理學(xué)、NGF含量及相關(guān)受體表達(dá)（TrkA及p75NTR）檢測(cè)。結(jié)果表明:
　　 (1)通過(guò)劑量依賴

4、性及時(shí)間依賴行分析，硫酸黏菌素每天靜脈注射15 mg/kg，連續(xù)給藥7d，可成功建立黏菌素神經(jīng)毒性小鼠模型。
　　 (2)通過(guò)神經(jīng)行為學(xué)組合測(cè)試及神經(jīng)電生理學(xué)測(cè)試，黏菌素可導(dǎo)致小鼠感覺(jué)功能及運(yùn)動(dòng)功能失調(diào)，其中熱痛閾值及SNCV及F波潛伏期最為敏感;提示F波潛伏期及SNCV可作為臨床黏菌素神經(jīng)毒性的指示性診斷指標(biāo)。
　　 (3)黏菌素可導(dǎo)致小鼠神經(jīng)系統(tǒng)氧化-抗氧化系統(tǒng)失衡，致使線粒體變性，caspase-9和3顯著升高;提