具有聚集誘導發(fā)光現(xiàn)象的熒光多肽的制備及其生物應用.pdf

1、高選擇性和敏感度的熒光探針越來越廣泛的被應用于感應分析和光學成像。傳統(tǒng)的熒光探針分子通常會表現(xiàn)出聚集誘導淬滅的現(xiàn)象。獨特的聚集誘導發(fā)光（AIE）提供了一種能夠徹底解決 ACQ問題的方法。AIE熒光基團擁在溶液中只有很弱的發(fā)射量。當這些分子聚集在一起的時候，可以呈現(xiàn)出非常強的熒光，這是由于它們在聚集狀態(tài)下會抑制分子內(nèi)的旋轉(zhuǎn)。AIE熒光基團的這種吸引人的特性為熒光分子和光穩(wěn)定納米聚集物在特異性檢測和成像方面的發(fā)展提供了一個嶄新的平臺。

2、>　　癌癥是目前世界范圍內(nèi)最容易導致死亡的疾病，對于癌癥早期的檢測與治療對于癌癥的治療具有非常重大的意義。研究發(fā)現(xiàn)凋亡的癌細胞能夠表達caspase-3/7，同時癌細胞內(nèi)谷胱甘肽的含量也遠遠高于正常細胞，因此，我們將AIE熒光探針與caspase3/7,GSH作用的多肽序列及AcDEVD-COOH及-S-S,相連接，從而實現(xiàn)對癌細胞的特異性的檢測。同時我們將多肽自主裝集團及有芳香集團的多肽氨基酸序列-GFFY-引入熒光探針中。我們合成了

3、兩組特異性的熒光探TPE-GFFYK-(AcDEVD)-COOOH,TPE-K(AcDEVD)-COOH TPE-GFFY-E-SS- EE–COOH, TPE-S-S-EE-COOH。通過在體外的實驗中發(fā)現(xiàn)，由于多肽序列較好的水溶性，低濃度的熒光探針單分散在 PBS中不發(fā)光。經(jīng)過caspase3/7，以及GSH,作用后，熒光探針親水部分AcDEVD-，-EE-COOH被切掉后，熒光集團在 PBS中聚集誘導發(fā)光。我們發(fā)現(xiàn)含有自組裝序列的

4、熒光探針與不含有組裝序列的同功能的熒光探針相比，在被Caspase-3作用和被谷胱甘肽還原和之后，具有更強的熒光對比度。這是由于自組裝集團的有序組裝使得熒光集團具有更強的聚集程度，從而使探針在被caspase3酶切，GSH還原后發(fā)出更強的熒光對。這一現(xiàn)象可以降低了應用于監(jiān)測的 AIE熒光探針的濃度，從而提高了檢測的靈敏度。我們將AIE熒光分子探針應用于凋亡的HepG2細胞的檢測，和A549細胞細胞內(nèi)谷胱甘肽的檢測，得到了與體外相一致的實