IAP B聚體的各亞基克隆及表達的初步研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩54頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、本研究用含有去纖維綿羊血的B-G培養(yǎng)基活化百日咳桿菌后，用改良的S-S液體培養(yǎng)基成功培養(yǎng)出不含其它培養(yǎng)基成分污染的百日咳桿菌。通過比較小批量細菌DNA提取法與CTAB法提取法發(fā)現，CTAB法提取的基因組DNA具有純度高、片段大的優(yōu)點。 在對IAPB聚體蛋白性質的進行初步分析后，選擇了以GST融合的方式試驗可溶性表達它的四個亞基(S2，S3，S4和S5)。通過比對已報道的四個典型株(152us，TohamaI，ptxslD，pt

2、xstrain18323)的基因序列的一致性，設計了四對分別帶有BamHI與XhoI酶切位點的引物。采用套式PCR解決了S2與S3基因同源性的影響，并特異性地擴增出了S2與S3的序列。S4、S5基因則由直接擴增產生。用凝膠回收試劑盒純化PCR產物后，將酶切片段連接到表達載體pGEX-6p-1上，并通過測序證實克隆的序列與已經報道的TohamaI完全一致，完成了IAPB聚體四個亞基的表達載體的構建工作。 將構建的表達質粒轉化E.

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論