組蛋白去乙酰化酶抑制劑帕比司他及其衍生物的設(shè)計、合成與初步活性研究.pdf

1、現(xiàn)如今人們已經(jīng)意識到基因性疾病所涉及到的表觀遺傳的異?，F(xiàn)象，其中影響癌癥發(fā)展過程中的組蛋白的修飾正是表觀遺傳機制中重要方面之一。人們發(fā)現(xiàn)了許多參與組蛋白修飾的酶，其中組蛋白去乙?；?HDACs)與組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶(HATs)正是一對在細胞核內(nèi)處于動態(tài)平衡的酶系，在染色體的結(jié)構(gòu)修飾以及基因的表達調(diào)控方面發(fā)揮著重要作用。HDACIs作為高效的抗腫瘤活性藥物，可以誘導腫瘤細胞凋亡，抑制其微血管形成，降低其遷徙性等。截止目前已有二十余種HD

2、ACIs正處于不同的臨床階段，四種通過美國FDA批準上市，一種經(jīng)CFDA批準上市。這無疑為人類在抗腫瘤治療方面提供了更多選擇和更有效的治療方案。
　　帕比司他(Panobinostat，LBH-589)，是由諾華公司(Novartis)研制開發(fā)的首個治療多發(fā)性骨髓瘤的HDACIs，并于2015年2月通過美國FDA批準上市。其在抑制HDACs活性的過程中，會減緩多發(fā)性骨髓瘤患者的漿細胞過度發(fā)育或直接導致這些危害性細胞的死亡。臨床研究

3、表明，帕比司他針對多發(fā)性骨髓瘤的治療效果明顯，因此在多發(fā)性骨髓瘤的治療領(lǐng)域有著迫切需求。我們經(jīng)過文獻調(diào)研，對帕比司他的合成路線進行了對比分析與初步合成工藝研究。同時以帕比司他作為先導化合物，在其基礎(chǔ)上結(jié)合活性較好的N1-羥基對苯二甲酰胺結(jié)構(gòu)片段，采用分子拼合原理及經(jīng)典藥效團模型，通過對L-色氨酸的羧基衍生化，針對蛋白表面識別區(qū)域設(shè)計并合成了一系列的N1-羥基對苯二甲酰胺類衍生物。
　　初期體外酶活性測定結(jié)果顯示，在脂肪族酰胺類衍生

4、物中脂肪鏈的長短對化合物的活性有顯著影響，其中短鏈化合物8b的抑制活性相對較高。在這一系列化合物中，芳香胺衍生物整體都顯示出較好的抑制活性，其中芳香環(huán)上的對位取代基系列活性較高?？傮w來說，尋找理想的對位取代基將直接影響對HDACs的抑制活性。根據(jù)抑酶結(jié)果顯示化合物12m相比對照藥SAHA表現(xiàn)出更好的抑制活性，并在HDAC2的X-衍射晶體結(jié)構(gòu)的對接研究中再次得到了驗證。為了進一步探索12m對HDACs亞型選擇性抑制，我們選取了HDAC1/

5、8(ClassⅠ)，HDAC6(ClassⅡb)，HDAC4(ClassⅡa)和HDAC11(ClassⅣ)亞型進行實驗，結(jié)果顯示當化合物濃度是100μM時，12m對HDAC4幾乎無抑制作用，且其他亞型的IC50值為微摩或毫微摩級別，這與其陽性對照藥非選擇性HDACIs，PXD101有著相似的選擇性趨勢。隨后對目標化合物進行了體外抗增殖的細胞實驗，結(jié)果顯示通過細胞初篩后的代表化合物(8d，12d，12j，12m)對HL60細胞的抗增殖能