葡萄糖濃度對(duì)大鼠胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響.pdf

1、背景：葡萄糖是胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞分化的重要因素之一，與分化后胰島素分泌細(xì)胞數(shù)量及分泌能力相關(guān)。
　　 目的：對(duì)比不同濃度葡萄糖誘導(dǎo)下，胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞分化后細(xì)胞的胰島素分泌能力，以確定理想的葡萄糖誘導(dǎo)胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞分化的濃度范圍，制定標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)方案。
　　 設(shè)計(jì)：隨機(jī)對(duì)照觀察。
　　 單位：青島市市立醫(yī)院細(xì)胞及肝膽胰實(shí)驗(yàn)室材料：胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞取自Wistar大鼠，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)動(dòng)物的處置符合動(dòng)物倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。
　　

2、 方法：使用膠原酶V消化動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所得到的胰腺組織，將葡聚糖Ficoll-400配成濃度梯度，分離及純化胰腺上皮細(xì)胞，從而獲取胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞。獲取的干細(xì)胞隨機(jī)分為10組。每一組均體外培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)增殖及分化形成胰島素分泌細(xì)胞。分化階段時(shí)各組均在含有10mM尼克酰胺及不同濃度葡萄糖的培養(yǎng)基中進(jìn)行，各組葡萄糖濃度分別為5.6mM、10.6mM、15.6 mM、20.6mM、25.6mM、30.6mM、35.6mM、45.6mM、55.6mM及10

3、5.6mM。使用免疫熒光染色法鑒定胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞。使用光化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)分化出的胰島素分泌細(xì)胞的胰島素分泌量。
　　 結(jié)果：葡萄糖濃度為20.6mM、25.6mM、30.6mM組的刺激指數(shù)高于其他組(P<0.05)，但這三組兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。葡萄糖濃度為15.6mM、20.6mM、25.6mM組的胰島素分泌量高于其他組(P<0.05)，但這三組兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：