擬南芥AtVPS34-RNAi突變體研究.pdf

1、哺乳動(dòng)物及酵母細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)，磷脂酰肌醇-3激酶(PI3KC3)在細(xì)胞內(nèi)吞、自噬、液泡蛋白分選等多條胞內(nèi)運(yùn)輸途徑中有關(guān)鍵作用。然而，對(duì)PI3KC3在擬南芥中的唯一一個(gè)同源基因AtVPS34研究較少，但確定的是AtVPS34具有P13KC3的功能，且AtVPS34敲除致死?；诖?，我們通過RNA干擾方法獲得了AtVPS34 mRNA表達(dá)程度不同的T3、T4代純合株系。通過一系列表型觀察、生理、分子指標(biāo)測(cè)定發(fā)現(xiàn)，AtVPS34-RNAi各株系

2、蓮座生長(zhǎng)速度、黃化苗下胚軸細(xì)胞長(zhǎng)度均小于野生型，主要?dú)w因于AtVPS34-RNAi細(xì)胞伸長(zhǎng)能力的顯著下降與細(xì)胞分裂能力的輕微下降。主根伸長(zhǎng)、側(cè)根發(fā)生及重力響應(yīng)在AtVPS34-RNAi中均有明顯缺陷，而極低濃度的生長(zhǎng)素IAA或NAA即能回補(bǔ)這些缺陷。NAA處理后，AtVPS34-RNAi突變體中生長(zhǎng)素響應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄本水平顯著高于野生型。同時(shí)，AtVPS34啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)GUS表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植物經(jīng)NAA處理后GUS信號(hào)顯著提高。指示生長(zhǎng)素響應(yīng)的