牛乳頭狀瘤病毒的檢測(cè)及其細(xì)胞感染試驗(yàn).pdf

1、牛乳頭狀瘤是由牛乳頭狀瘤病毒(Bovine Papillomavirus，BPV)引起的皮膚、黏膜上皮增生性病變，是一種在世界范圍內(nèi)牛群中廣泛存在的感染性疾病。目前已確定BPV有13個(gè)基因型。其中，除BPV-1和BPV-2可跨種屬誘發(fā)馬屬動(dòng)物產(chǎn)生纖維乳頭狀瘤外，都具有嚴(yán)格的種屬特異性。由于該病是自愈性良性腫瘤，還沒(méi)有引起重視，當(dāng)該病毒與歐洲蕨類共同作用時(shí)，會(huì)誘發(fā)癌癥。本研究通過(guò)對(duì)牛乳頭狀瘤病毒的檢測(cè)和鑒定，確定我國(guó)一些牛場(chǎng)發(fā)生本病病毒類

2、型。通過(guò)牛乳頭狀瘤病毒對(duì)NIH-3T3細(xì)胞感染，初步探討牛乳頭狀瘤細(xì)胞模型，為進(jìn)一步研究BPV致病機(jī)理及篩選有效的治療藥物提供依據(jù)。
　　 試驗(yàn)通過(guò)對(duì)臨床患有乳頭狀瘤樣贅生物的病牛進(jìn)行臨床觀察、組織病理學(xué)及免疫組織化學(xué)檢查做初步診斷。利用腫瘤勻漿液接種11日齡雞胚絨毛尿囊膜，觀察其對(duì)雞胚生長(zhǎng)特性的影響。通過(guò)PCR檢測(cè)乳頭狀瘤病毒，并確定其基因型，進(jìn)而對(duì)乳頭狀瘤進(jìn)行確診。利用乳頭狀瘤病毒懸液感染NIH-3T3細(xì)胞，觀察細(xì)胞形態(tài)的變

3、化及檢測(cè)細(xì)胞中BPV DNA情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:經(jīng)臨床觀察發(fā)現(xiàn)，牛乳頭狀瘤多為花椰菜狀和結(jié)節(jié)狀，灰褐色或黑色，0.5～7cm大小不等，質(zhì)地堅(jiān)硬;組織病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，表皮細(xì)胞出現(xiàn)角化過(guò)度和部分顆粒細(xì)胞空泡化的現(xiàn)象:免疫組織化學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，瘤組織樣品胞漿被棕染，而對(duì)照組未被棕染:雞胚絨毛尿囊膜接種雞胚少見死亡及特征性病變，死亡胚中未檢測(cè)到BPV病毒粒子。通過(guò)PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)從該牛場(chǎng)的牛乳頭狀瘤樣品中提取的DNA樣品是由BPV-1和BPV-2兩種