烏藥中揮發(fā)油及生物堿成分的分離分析方法研究.pdf

1、烏藥作為我國(guó)的傳統(tǒng)中藥材，以產(chǎn)自浙江天臺(tái)地區(qū)為道地藥材，素有天臺(tái)烏藥之稱，具有廣泛的藥理活性，其活性成分主要為揮發(fā)油、生物堿和呋喃倍半萜及其內(nèi)酯三大類。目前國(guó)內(nèi)外研究主要集中于呋喃倍半萜及其內(nèi)酯，而對(duì)于揮發(fā)油和生物堿類成分的研究相對(duì)較少。研究表明烏藥中的揮發(fā)油成分具有抗菌，抗腫瘤以及調(diào)節(jié)腸胃功能等作用，生物堿成分具有抗炎，抗氧化以及抗癌等作用。然而烏藥中揮發(fā)油及生物堿的成分復(fù)雜，且含量較低，利用傳統(tǒng)的分離分析方法效率不高。本論文采用氣質(zhì)

2、聯(lián)用技術(shù)，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)及高速逆流色譜技術(shù)等現(xiàn)代分離分析方法，針對(duì)天臺(tái)烏藥中的揮發(fā)油及生物堿成分進(jìn)行研究。研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　1、采用傳統(tǒng)的蒸餾法提取天臺(tái)烏藥中的揮發(fā)油成分，分別考察浸泡時(shí)間，料液比，提取時(shí)間對(duì)提取效果的影響，得到最優(yōu)提取工藝為:浸泡時(shí)間3h，液料比12 mL/g，提取時(shí)間3h。研究建立了烏藥揮發(fā)油化學(xué)成分的氣質(zhì)聯(lián)用分析方法，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索并與相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行比對(duì)，確定了揮發(fā)油中的39個(gè)化學(xué)成分。結(jié)果表明此方法分

3、析速度快，且對(duì)含量較低的揮發(fā)性成分也有較好的分析效果，適用于天臺(tái)烏藥中揮發(fā)油成分的分析。
　　2、采用超聲輔助溶劑法提取天臺(tái)烏藥中的有效成分，通過(guò)酸水堿化處理，再經(jīng)萃取得到生物堿提取物。通過(guò)優(yōu)化流動(dòng)相、流速等參數(shù)，建立天臺(tái)烏藥中生物堿類化合物的高效液相色譜分析方法。在此條件下建立液質(zhì)聯(lián)用快速分析方法，根據(jù)高效液相色譜-高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜獲得的精確分子量確定化合物的分子式，再經(jīng)過(guò)二級(jí)質(zhì)譜得到的結(jié)構(gòu)碎片進(jìn)行解析，分析鑒定了天臺(tái)烏藥生物

4、堿提取物中的6個(gè)化合物分別為深山黃堇堿、降波爾定堿、前荷葉堿、去甲異波爾定、波爾定堿和網(wǎng)脈番荔枝堿，并在此基礎(chǔ)上總結(jié)天臺(tái)烏藥中異喹啉類生物堿的質(zhì)譜裂解規(guī)律。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該方法靈敏度高，分析速度快，特別適用于天臺(tái)烏藥中的微量生物堿類化合物的快速篩選與檢測(cè)。
　　3、研究建立了天臺(tái)烏藥中生物堿類化合物的高速逆流色譜分離方法。采用正丁醇-乙酸乙酯-0.5％乙酸(4∶1∶5，v/v)為兩相溶劑體系，一次性從400 mg生物堿提取物中分離得