Ets-1在漿液性卵巢癌中的表達及意義.pdf

1、目的:卵巢癌是導致婦女死亡的三大生殖器腫瘤之一，發(fā)病機制尚不清楚，由于缺乏早期診斷手段，其死亡率居婦科惡性腫瘤首位，是嚴重威脅女性健康的生殖道惡性腫瘤。探討E26轉錄因子-1(E26 transformation-specific-1，Ets-1)在漿液性卵巢癌組織中的表達及意義，分析Ets-1與漿液性卵巢癌患者臨床病理資料之間的關系，為卵巢癌這種發(fā)病率高、惡性程度高、死亡例數(shù)高的婦科腫瘤的發(fā)病機制提供新的理論參考。
　　方法:收

2、集2014年12月至2016年5月在中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院婦科住院手術的漿液性卵巢癌新鮮組織30例、石蠟組織40例，正常卵巢新鮮及石蠟組織各30例。兩組間年齡比較差異無統(tǒng)計學意義。用熒光定量PCR(RT-PCR)方法檢測新鮮組織中Ets-1 mRNA在轉錄水平的表達情況，具體操作:提取組織RNA，經(jīng)DNA消化酶Ⅰ處理純化RNA，逆轉錄成cDNA，進行PCR反應，內參選用GAPDH;通過蛋白免疫印跡檢測新鮮組織中蛋白表達情況，步驟為:提

3、取組織蛋白質，配制10％的SDS-PAGE凝膠，電泳分離目的蛋白，轉膜、脫脂牛奶封閉、Ets-1一抗孵育，4℃過夜，與相應二抗結合，發(fā)光，內參選用GAPDH;用免疫組織化學方法檢測石蠟組織中Ets-1蛋白表達情況，具體為:連續(xù)切片、梯度脫蠟、枸櫞酸鈉抗原修復，S-P法順序操作、抗體孵育，DAB顯色、蘇木素復染、梯度脫水及封片。最后分析Ets-1的表達與漿液性卵巢癌臨床病理參數(shù)（FIGO分期、淋巴結、年齡、分級、CA125水平及腹水量）之

4、間的關系。
　　結果:Ets-1蛋白在漿液性卵巢癌石蠟組織中的陽性表達率(75％)明顯高于正常卵巢石蠟組織(13.3％)，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。臨床病理參數(shù)分析發(fā)現(xiàn):Ets-1表達量與卵巢癌FIGO分期及淋巴結是否轉移有關（P＜0.05），與患者年齡、分級、CA125水平及腹水量均無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。RT-PCR顯示正常卵巢新鮮組織和漿液性卵巢癌新鮮組織中Ets-1 mRNA在轉錄水平相對表達量分