二倍體馬鈴薯DM及幾個野生近緣種染色體識別和比較FISH的分析.pdf

1、馬鈴薯是世界上僅次于小麥、水稻的重要作物。雖然二倍體栽培種富利亞薯（Solanum phureja，2n=24）DM已經(jīng)完成測序工作，極大地推動了馬鈴薯基因組研究。然而由于二代測序和組裝的局限性，我們對串聯(lián)重復序列在栽培馬鈴薯及其野生近緣種染色體上的位置、分布以及豐度等信息不完全清楚。此外，現(xiàn)代細胞生物學染色體精確識別技術已廣泛在多物種中建立，相對其他作物，該技術在栽培二倍體馬鈴薯及其野生近緣種中還未建立。
　　本文利用12個來自

2、S.tuberosum已知連鎖群的BAC克隆，結合rDNA重復序列（5S rDNA和45S rDNA）、著絲粒重復序列（St18、St49、St57和St3-294）和亞端粒重復序列（CL14和CL34）作為探針，與DM有絲分裂中期染色體進行熒光原位雜交，確定了這些重復序列在不同染色體連鎖群上的分布、位置和信號強度。建立了二倍體馬鈴薯DM染色體識別圖和遺傳連鎖圖的聯(lián)系。
　　結合以上重復序列在染色體上的分布特點，選取一個著絲粒重復

3、序列(St3-238)、兩個rDNA重復序列(5S rDNA和45S rDNA)以及兩個亞端粒重復序列（CL14和CL34）作為探針并進行多色熒光標記，在DM有絲分裂中期同一分裂相上進行兩次連續(xù)的多色熒光原位雜交，讓二倍體DM的每一條染色體都帶上不同的信號，達到精確識別DM的不同染色體的目的。建立了二倍體馬鈴薯一次性染色體辨認技術。
　　此外，將已建立的DM染色體識別體系，推廣到其他幾個二倍體野生近緣種全套染色體辨認工作和比較FI