化學修飾對Trigger Factor分子伴侶功能的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、細胞中蛋白的穩(wěn)態(tài)由眾多的蛋白因子來維持,這些因子共同形成一個可協(xié)調的穩(wěn)態(tài)網絡。分子伴侶是穩(wěn)態(tài)網絡成員中重要的一員,并且參與到所有的維持蛋白穩(wěn)態(tài)的活動中。新生蛋白通常需要分子伴侶的協(xié)助才可以有效地折疊成有功能的三維結構。分子伴侶能夠協(xié)助新生肽鏈的折疊,確保新生肽鏈不會錯誤折疊或者聚集。大腸桿菌Trigger Factor(TF)是核糖體結合分子伴侶,是大腸桿菌內新生肽鏈遇到的第一個分子伴侶。
  TF的結構中存在有一些特殊的區(qū)域,推

2、測與TF功能相關。為了了解這些區(qū)域對TF功能的作用,本研究通過定點突變方法將所選擇的14個位點對應的氨基酸殘基用半胱氨酸殘基替換,隨后選取碘乙酰胺、碘乙酸、2-溴乙胺和N-苯基馬來酰亞胺對半胱氨酸殘基進行化學修飾從而改變局部理化性質;進而以溶菌酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶作為底物蛋白,檢測TF突變體幫助變性蛋白質重新折疊以及阻止變性蛋白聚集的能力。通過比較化學修飾前后TF分子伴侶活性的差異,分析了這些區(qū)域在TF分子伴侶功能中的作用。研究結

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