紅景天苷對急性力竭大鼠心肌細胞凋亡通路的影響.pdf

1、目的：探討紅景天苷能否通過減輕急性力竭大鼠心肌缺血，調控死亡受體和線粒體介導的凋亡通路減少心肌細胞凋亡，發(fā)揮心肌保護作用。
　　方法：雄性SD大鼠，隨機分為4組（n=6）：對照組（Con）、力竭組（EE）、低劑量紅景天苷預處理力竭組（SEL），高劑量紅景天苷預處理力竭組（SEH）。SEL、SEH組分別給予紅景天苷15、30mg/kg/d腹腔注射15天。Con組、EE組給予0.9％NaCl（3ml/kg/d）腹腔注射15天。給藥完成

2、后，Con組不做任何運動，EE組、SEL組、SEH組進行一次性力竭性游泳運動，參照Thomas力竭標準，一次性游泳訓練至力竭。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定各組血清缺血修飾清蛋白（IMA）含量，原位標記（TUNEL）檢測與半定量分析測定心肌細胞的凋亡指數(shù)（AI），免疫組化法檢測心肌Bax/Bcl-2，蛋白印跡法（Western-Blot）檢測心肌Fas，Cyto-C，Caspase-3、8、9表達情況。
　　結果：
　

3、　1、紅景天苷對力竭大鼠血清IMA含量的影響
　　與 Con組（15.31±1.98U/ml）相比,大鼠血清 IMA含量 EE組（41.24±4.848U/ml）和SEL組（32.09±2.068U/ml）顯著升高（P＜0.05）。SEL組和SEH組（18.85±2.178U/ml）較EE組降低，均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），且SEH組較SEL組降低更為明顯（P＜0.05）。表明Sal可明顯降低力竭心臟缺血水平。
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4、、紅景天苷對力竭運動心肌細胞AI的影響
　　TUNEL法檢測凋亡細胞，陽性細胞核染成棕褐色，可見核形態(tài)呈碎點狀。AI結果顯示EE組（36.00±2.00）%和SEL組（35.60±8.26）%較Con組（27.00±4.32）%顯著升高（P＜0.05）。SEL組和EE組兩組之間無顯著統(tǒng)計學差異（P＞0.05），SEH組AI（23.83±3.812）%降低尤為明顯，與SEL組和EE組比較有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。表明Sal可明顯

5、降低力竭心臟凋亡水平。
　　3、紅景天苷對力竭大鼠心肌Bax表達的影響
　　免疫組化法檢測Bax蛋白，陽性信號定位于細胞漿和細胞膜,呈棕黃色細顆粒?；叶戎礒E組（66.60±6.73）%、SEL組（57.00±7.70）%較Con組（42.83±10.03）%顯著升高（P＜0.05），SEH組（44.60±10.26）較EE組和SEL組明顯降低，有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。表明Sal可明顯降低力竭心臟Bax蛋白表達水平。<

6、br>　　4、紅景天苷對力竭大鼠心肌Bcl-2表達的影響
　　免疫組化法檢測Bcl-2蛋白，陽性信號定位于細胞漿和細胞膜,呈棕黃色細顆粒。灰度值EE組（27.67±5.03）%、SEL組（33.25±4.03）%較Con（52.25±14.22）%組顯著降低（P＜0.05），SEH組（56.00±13.51）%較EE、SEL組明顯升高（P＜0.05）。表明Sal可明顯升高力竭心臟Bcl-2蛋白表達水平。
　　5、紅景天苷對力

7、竭大鼠心肌 Fas, Cyto-C, Caspase-3, Caspase-8, Caspase-9的影響
　　灰度值EE組Fas（0.554±0.082），Cyto-C（0.865±0.190），Caspase-3（0.731±0.107），Caspase-8（0.711±0.125），Caspase-9（0.488±0.114）、SEL組Fas（0.296±0.021），Cyto-C（0.528±0.121），Caspase-

8、3（0.497±0.072）， Caspase-8（0.517±0.111）， Caspase-9（0.291±0.134）較 Control組（0.102±0.032，0.163±0.019，0.143±0.033，0.153±0.033，0.091±0.032）顯著升高（P＜0.05）， SEL組和SEH組Fas（0.181±0.027）， Cyto-C（0.270±0.050），Caspase-3（0.262±0.044），Cas

9、pase-8（0.268±0.054）， Caspase-9（0.164±0.067）較EE組降低，均具有明顯統(tǒng)計學意義（P＜0.05）， SEH組Fas，Cyto-C，Caspase-3，Caspase-8較SEL組明顯降低，并具有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。以上結果表明，Sal可降低力竭大鼠Fas，Cyto-C， Caspase-3，Caspase-8，Caspase-9的表達水平，通過抑制死亡受體和線粒體凋亡通路降低心肌細胞凋亡水