渤海海域抗菌活性微生物的篩選和鑒定.pdf

1、在不同溫度和pH條件下，利用不同營養(yǎng)物濃度的海洋細菌、真菌、放線菌分離培養(yǎng)基，從渤海海水樣品中篩選到87株海洋細菌、127株海洋真菌(均為霉菌)和14株海洋放線菌。 28℃、160r/min條件下對所篩的87株海洋細菌進行液體發(fā)酵，利用牛津杯法對發(fā)酵液進行抗細菌活性檢測，研究結果表明：28株細菌對大腸桿菌(Escherichiacoli)或金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)有不同程度的抑制作用，陽性篩選率

2、為32.2％；8株細菌可抑制上述2種指示菌，陽性篩選率為9.2％，A49菌株的活性最強。以玉蜀黍平臍蠕孢菌(Bipolarismaydis)、大麗輪枝菌(Verticilliumdahliae)、麥根腐平臍蠕孢菌(Bipolarissorokiniana)、大豆尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporum)、蘋果黑腐皮殼菌(Valsamali)、茄鏈格孢菌(Alternariasolani)、煙草疫霉菌(Phytophthorapar

3、asiticavarnicotianae)和立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)等8種植物病原真菌為指示菌，采用濾紙片擴散法對28株抗性細菌進行活性檢測，結果均呈陰性。通過對菌株A49進行菌落形態(tài)、個體形態(tài)觀察以及生理生化試驗，依據(jù)《伯杰氏細菌鑒定手冊》可知菌株A49屬于芽孢桿菌科(Bacillaceae)，芽孢桿菌屬(Bacillussp.)。對其16SrDNA進行系統(tǒng)發(fā)育分析，確定其為芽孢桿菌屬，暫命名為Bacilliu

4、ssp.A49。 以8種植物病原真菌為指示菌，采用雙向培養(yǎng)法對116株常溫海洋霉菌進行抗菌活性初篩，結果得到41株霉菌對植物病原真菌有不同程度的抑制作用。根據(jù)《真菌鑒定手冊》，對其中抗菌譜較廣的4株霉菌進行了地位分類，確認32＃霉菌為曲霉屬，40＃霉菌為耳霉屬，67＃和18＃霉菌為青霉屬。利用濾紙片擴散法對41株活性霉菌進行復篩，得到l株抗菌譜廣、活性強的67＃菌株，其他菌株沒有檢測到活性。利用生長速率法檢測67＃菌株發(fā)酵液對B

5、.maydis、V.dahliae、F.oxysporum、V.mali、P.nicotianae和A.solani等6種指示菌的抑制率和EC50，抑制率分別為40.0％、30.6％、36.7％、23.5％、30.0％和26.3％，EC50分別為3.1615、3.575l、3.1623、4.8686、4.3914和4.7676。以大腸桿菌和金黃色葡萄球菌為指示菌，利用牛津杯法對41株活性霉菌進行抗細菌活性檢測，沒有篩選到既抑制真菌又抑制