一組MicroRNAs在睪丸發(fā)育中的表達及MicroRNA-125a對精原干細胞發(fā)育的調節(jié).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、精子發(fā)生過程是一個高度復雜和精密的過程，起源于精原干細胞（spermatogonial stem cell，SSCs）自我更新和分化，并受到廣泛的調節(jié)。MicroRNA在調節(jié)精子發(fā)生的準確性和復雜性上起著至關重要的作用。
　　通過熒光定量RT-PCR檢測了34個miRNAs在睪丸不同發(fā)育時期的表達量，結果顯示，不同的microRNAs在睪丸發(fā)育中具有不同的表達模式。大部分 microRNAs睪丸發(fā)育過程中的表達具有高度的階段特異性

2、，他們分別在精子發(fā)生的不同時期起著調控作用。MiR-125a，miR-322，miR-199b，miR-295等在睪丸發(fā)育過程中表達量顯著下降，而miR-34c，miR-29b在睪丸過程中表達量顯著上升?；诖私Y果，我們挑選miR-125a進行進一步的研究。構建miR-125a慢病毒過表達和抑制載體并包裝成慢病毒顆粒,然后使該病毒顆粒感染體外培養(yǎng)的SSCs，結果發(fā)現(xiàn)miR-125a的過表達能增加體外培養(yǎng)的SSCs數目，而miR-125a

3、的抑制則降低體外培養(yǎng)的SSCs數目。EdU標記法和Hoachst33342、PI（碘化丙啶）雙染實驗結果顯示miR-125a能通過促進體外培養(yǎng)SSCs的增殖、抑制凋亡調控體外培養(yǎng)SSCs的數目。通過軟件預測、結合文獻報道資料以及實時熒光定量RT-PCR和Western blot證明Bak1是miR-125a的一個靶基因。miR-125a很可能通過調控Bak1的表達抑制體外培養(yǎng)SSCs的凋亡。MicroRNA在精子發(fā)生過程中功能的闡明能加

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