缺氧缺血后新生大鼠腦組織中AP4M1及AMPA受體的表達(dá)變化.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的：
　　在新生大鼠缺氧缺血性腦損傷模型上，觀察缺氧缺血后不同時(shí)間點(diǎn)皮質(zhì)、海馬、紋狀體及小腦中AP4M1、AMPA受體的表達(dá)變化，以探尋缺氧缺血性腦損傷的機(jī)制。
　　材料及方法：
　　本課題選用7日齡SD（SpragueDawley）大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，制備缺氧缺血性腦損傷模型（HIBD），應(yīng)用Real-timePCR、Westernblot從在體層面研究HI后12小時(shí)、24小時(shí)、72小時(shí)皮質(zhì)、海馬、紋狀體及小腦中AP4

2、M1、AMPA受體mRNA和蛋白水平的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1、HI后AP4M1、AMPA受體在皮質(zhì)中表達(dá)變化
　　1）HI后12小時(shí)皮質(zhì)中AP4M1mRNA表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)較前升高，72小時(shí)恢復(fù)至正常水平（F=3.587，p=0.043）；HI后12小時(shí)AP4M1蛋白出現(xiàn)顯著表達(dá)下調(diào)，72小時(shí)較前升高，仍低于正常對(duì)照組（F=5.320，p=0.022）。
　　2）HI后12小時(shí)皮質(zhì)中GluR1mRNA出

3、現(xiàn)表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)后較前升高，72小時(shí)表達(dá)仍顯著低于正常對(duì)照組（F=103.000，p=0.000）；HI后12小時(shí)GluR1蛋白顯著表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)較前升高，72小時(shí)仍低于正常對(duì)照組（F=574.711，p=0.000）。
　　3）HI后12小時(shí)皮質(zhì)中GluR2mRNA表達(dá)無顯著變化，24小時(shí)表達(dá)下調(diào)，72小時(shí)較前輕度升高，仍低于正常對(duì)照組（F=7.823，p=0.005）；HI后12小時(shí)GluR2蛋白表達(dá)輕度下調(diào)，24小時(shí)

4、表達(dá)顯著下調(diào)，72小時(shí)較前輕度升高，仍低于正常對(duì)照組（F=410.933，p=0.000）。
　　2、HI后AP4M1、AMPA受體在海馬中表達(dá)變化
　　1）HI后12小時(shí)海馬中AP4M1mRNA表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)降至最低，72小時(shí)較前升高，仍顯著低于正常對(duì)照組（F=154.327，p=0.000）；HI后12小時(shí)AP4M1蛋白顯著表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)表達(dá)降至最低，72小時(shí)較前升高，仍低于正常對(duì)照組（F=330.060，p=0

5、.000）。
　　2）HI后12小時(shí)海馬中GluR1mRNA表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)下調(diào)至最低，72小時(shí)表達(dá)較前升高，仍顯著低于正常對(duì)照組（F=9.074，p=0.003）；HI后12小時(shí)GluR1蛋白顯著表達(dá)下調(diào)，24降至最低，72小時(shí)較前高，仍低于正常對(duì)照組（F=807.019，p=0.000）。
　　3）HI后12小時(shí)海馬中GluR2mRNA表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)降至最低，72小時(shí)較前輕度升高，仍低于正常對(duì)照組（F=4.594，

6、p=0.028）；HI后12小時(shí)GluR2蛋白表達(dá)輕度下調(diào)，24小時(shí)降至最低，72小時(shí)表達(dá)較前升高，仍低于正常對(duì)照組（F=425.574，p=0.000）。
　　3、HI后AP4M1、AMPA受體在紋狀體中表達(dá)變化
　　1）HI后12小時(shí)紋狀體中AP4M1mRNA表達(dá)顯著下調(diào)，24小時(shí)表達(dá)較前升高，72小時(shí)仍顯著低于正常對(duì)照組（F=8.556，p=0.003）；HI后12小時(shí)AP4M1蛋白顯著下調(diào)，24小時(shí)表達(dá)較前升高，72

7、小時(shí)仍低于正常對(duì)照組（F=555.071，p=0.000）。
　　2）HI后12小時(shí)紋狀體中GluR1mRNA表達(dá)下調(diào)，72小時(shí)表達(dá)較前升高，仍顯著低于正常對(duì)照組（F=161.996，p=0.000）；GluR1蛋白在HI后12小時(shí)、24小時(shí)及72小時(shí)無顯著差異（F=0.908，p=0.437），均低于正常對(duì)照組。
　　3）HI后12小時(shí)紋狀體中GluR2mRNA表達(dá)下調(diào)至最低，24小時(shí)表達(dá)較前升高，72小時(shí)表達(dá)仍低于正常對(duì)

8、照組（F=18.483，p=0.000）；HI后12小時(shí)GluR2蛋白表達(dá)下調(diào)至最低，24小時(shí)表達(dá)較前升高，72小時(shí)表達(dá)仍低于正常對(duì)照組（F=90.438，p=0.000）。
　　4、HI后AP4M1、AMPA受體在小腦中表達(dá)變化
　　1）HI后12小時(shí)、24小時(shí)及72小時(shí)小腦中AP4M1mRNA均低于正常對(duì)照組，三組間無顯著差異（F=0.602，p=0.56）；HI后12小時(shí)、24小時(shí)、72小時(shí)AP4M1蛋白均較正常對(duì)照組

9、輕度下調(diào)，三組無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=1.184，p=0.369）。
　　2）HI后12、24、72小時(shí)小腦中GluR1mRNA表達(dá)較正常對(duì)照組輕度下調(diào)，三組表達(dá)無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=0.102，p=0.903）；HI后12小時(shí)GluR1蛋白無顯著變化，24小時(shí)顯著下調(diào)，72小時(shí)較前表達(dá)無顯著差異，仍低于正常對(duì)照組（F=312.032，p=0.000）。
　　3）HI后12小時(shí)小腦中GluR2mRNA表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)降至最低

10、，72小時(shí)表達(dá)較前升高，仍低于正常對(duì)照組（F=56.718，p=0.000）；HI后12小時(shí)GluR2蛋白表達(dá)下調(diào)，24小時(shí)降至最低，72小時(shí)表達(dá)較前升高仍低于正常對(duì)照組（F=312.032，p=0.000）。
　　結(jié)論：
　　1．HI后皮質(zhì)、海馬、紋狀體及小腦中GluR1和GluR2在mRNA及蛋白水平出現(xiàn)不同程度表達(dá)下調(diào)；
　　2．HI后皮質(zhì)、海馬和紋狀體中AP4M1在mRNA及蛋白水平出現(xiàn)不同程度表達(dá)下調(diào)，而在小

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