基因載體陽(yáng)離子類脂設(shè)計(jì)合成及生物性能研究.pdf

1、本論文設(shè)計(jì)了2類基因載體陽(yáng)離子類脂，合成、提純了計(jì)40個(gè)化合物，其中大部分為新化合物，全部產(chǎn)品經(jīng)過(guò)IR，1HNMR，13CNMR，HRMS或MS表征結(jié)構(gòu)正確，純度符合轉(zhuǎn)染要求。 所合成陽(yáng)離子類脂可制成陽(yáng)離子脂質(zhì)體(囊泡)，采用TEM，動(dòng)態(tài)光散射，及zeta-電位儀等手段對(duì)其進(jìn)行研究，初步得到陽(yáng)離子類脂及由其所制備出的陽(yáng)離子脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)與性能的關(guān)系。所制備的陽(yáng)離子脂質(zhì)體可和DNA形成脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物。采用瓊脂糖凝膠電泳的方法

2、對(duì)脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物進(jìn)行表征。 采用所制備的陽(yáng)離子脂質(zhì)體作為基因運(yùn)載工具，轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)粒DNApGL3-control對(duì)COS-7細(xì)胞株及Hep-2細(xì)胞株進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，以2種商品化基因轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine2000及Sofast進(jìn)行對(duì)照，篩選出6個(gè)轉(zhuǎn)染效率較高的陽(yáng)離子脂質(zhì)體。采用所篩選出來(lái)的6個(gè)基因載體陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)粒DNApGL3-control在另外3種哺乳動(dòng)物細(xì)胞株B16，MCF-7，Hepa1-6中進(jìn)行

3、細(xì)胞轉(zhuǎn)染校驗(yàn)實(shí)驗(yàn)；采用所篩選出來(lái)的6個(gè)基因載體陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)粒DNApGFP-N2在5種細(xì)胞株COS-7，Hep-2，B16，MCF-7，Hepa1-6中進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染校驗(yàn)實(shí)驗(yàn)，證實(shí)所篩選出的6個(gè)陽(yáng)離子脂質(zhì)體基因載體的轉(zhuǎn)染效率高于或相當(dāng)于2種商品化基因轉(zhuǎn)染試劑。采用MTT方法對(duì)所篩選出的6個(gè)陽(yáng)離子脂質(zhì)體的細(xì)胞毒性進(jìn)行了測(cè)量，證實(shí)所篩選出的6個(gè)陽(yáng)離子脂質(zhì)體基因載體的細(xì)胞毒性很低，具有作為基因載體的應(yīng)用前景。 對(duì)陽(yáng)離子類脂結(jié)構(gòu)與