囊泡運輸相關基因OsRab7在水稻抗鹽中的功能.pdf

1、鹽脅迫是抑制植物生長發(fā)育,減少農作物產量的主要逆境脅迫之一。長期以來,如何提高植物的抗鹽能力,增加農作物在高鹽脅迫下的產量一直是研究者關注的焦點。發(fā)掘植物中的抗鹽相關基因,從而探索植物對高鹽脅迫的耐受機制并提高農作物對高鹽謝脅迫的抗性是當前科學研究的重點問題。水稻是全世界重要的糧食作物之一,其產量受到了一些逆境脅迫(高鹽、高低溫)的嚴重影響。因此研究水稻的抗鹽,并進一步提高水稻抗鹽能力具有重要意義。囊泡運輸相關蛋白家族Rab家族在植物抗

2、鹽中起到某些關鍵作用,其中對Rab7的研究表明,AtRab7和NtRab7的過量表達分別提高了轉基因擬南芥及轉基因煙草對逆境脅迫(鹽脅迫,低溫)的耐受性。且有研究表明水稻的Rab7的表達也受到不同外界脅迫的調控,但在其在水稻應答非生物脅迫(鹽脅迫,低溫)過程中的功能及其機理尚不清楚。
　　 本實驗構建了OsRab7的原核表達載體,研究了OsRab7蛋白的表達對大腸桿菌抗鹽,抗高、低溫的影響。并構建了OsRab7的植物轉基因載體,

3、獲得陽性OsRab7轉基因水稻植株,研究轉基因植株苗期在高鹽條件下的生長發(fā)育表型(平均生長速率、根生長情況等),進一步通過對轉基因植株幼苗在受到高鹽傷害后的恢復生長表型的觀測,基本明確OsRab7基因在水稻抗逆中的功能。其中對囊泡運輸相關基因OsRab7在水稻中的抗鹽功能研究為水稻抗逆分子機制探索及水稻抗逆育種提供了理論與實踐基礎。
　　 主要結果如下:
　　 1.構建了OsRab7的原核表達載體,并成功表達了OsRab

4、7蛋白。OsRab7陽性轉化子的抗鹽及抗高低溫研究證明,OsRab7的表達能夠提高大腸桿菌的抗逆(高鹽,高低溫)能力。
　　 2.成功構建了OsRab7的轉基因載體(正義,反義,干擾,GFP),共獲得To代水稻植株222株,其中陽性植株196株,轉基因效率為88.2％。對T0代水稻植株進行繁殖加代(各選20粒種子),共獲得T1代水稻陽性植株37株。對OsRab7的正義轉基因植株的抗鹽檢測表明,與野生型相比,正義轉基因的植株抗鹽能