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1、目的:運(yùn)脾散是國(guó)家級(jí)名老中醫(yī)黃建業(yè)教授的經(jīng)驗(yàn)方,臨證應(yīng)用其治療脾運(yùn)失健之腹瀉、厭食療效顯著,為進(jìn)一步了解運(yùn)脾散治療小兒腹瀉的機(jī)理,探索其對(duì)脾胃功能的影響和調(diào)節(jié)功能,采用飲食因素建立傷食瀉大鼠模型,了解運(yùn)脾散對(duì)血清胃泌素、淀粉酶、小腸粘膜、小腸吸收率和大鼠小腸推進(jìn)的影響和調(diào)節(jié),為運(yùn)脾散治療腹瀉提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù),為進(jìn)一步推廣名老中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)方提供理論支持。
方法:選擇60-80g的SD大鼠50只,隨機(jī)(雄雌各半)分為模型組30只,空
2、白組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)A組)20只;同時(shí)配置高蛋白、高能量特制飼料與運(yùn)脾散濃縮液。造模5天,成功對(duì)模型組大鼠完成傷食瀉模型造模后,分別隨機(jī)從A組與模型組各取出10只(雌雄各半),完成實(shí)驗(yàn)前大鼠的實(shí)驗(yàn)室相關(guān)取材,以了解造模成功后模型組大鼠相關(guān)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)改變情況。治療前將模型組大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)B組)10只、運(yùn)脾散中藥組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)C組)10只,A組剩余10只不變。治療方法:分別對(duì)A、B兩組按0.2ml/g灌服生理鹽水,C組按0.2ml/g灌
3、服運(yùn)脾散濃縮液,每天一次,同時(shí)觀察并記錄3組大鼠大便性狀、大便次數(shù)、食量、體重的改變,治療3天后,大鼠大便變干,對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行取材:A、B、C3組分別取5只大鼠,灌服D-木糖溶液,取大鼠血清測(cè)定大鼠血清胃泌素、淀粉酶、D-木糖,處死后迅速取小腸近空腸端小腸粘膜,固定,以在投射電鏡下觀察小腸粘膜超微結(jié)構(gòu);各組剩余5只大鼠灌服印度墨汁,處死后剪取小腸(上端至幽門(mén),下端至回盲部)腸管,測(cè)量腸管長(zhǎng)度以及墨汁在腸管內(nèi)的運(yùn)動(dòng)距離,以計(jì)算墨汁的推進(jìn)率
4、,來(lái)評(píng)估實(shí)驗(yàn)大鼠小腸推進(jìn)速率。
結(jié)果:1.本研究所使用傷食瀉造模方法可行:模型組大鼠在造模第二天開(kāi)始出現(xiàn)大便變軟,水分增多,造模第5天,所有模型組大鼠大便溏泄,大便次數(shù)明顯增多(P<0.05),體重食量較空白組大鼠明顯降低(P<0.05),可以認(rèn)為,模型組大鼠傷食瀉造模成功。
2.模型組大鼠血清胃泌素、淀粉酶、D-木糖水平均明顯低于空白組正常大鼠(P<0.05),傷食瀉實(shí)驗(yàn)大鼠小腸推進(jìn)功能較空白組實(shí)驗(yàn)大鼠無(wú)顯著差異(
5、P>0.05)。
3.在透射電鏡下觀察小腸粘膜上皮細(xì)胞,可以看到微絨毛排列整齊,但上皮細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)大量空泡組織,線粒體水腫、水樣變,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)間隙增寬,未見(jiàn)細(xì)胞核的改變。
4.經(jīng)治療后,C組與B組大鼠大便均恢復(fù)正常,C組大鼠大便恢復(fù)正常所需要的時(shí)間明顯短于B組(P<0.05);C組大鼠食量、體重較治療前均明顯恢復(fù)(P<0.05)
5.治療后,C組大鼠血清胃泌素、淀粉酶、D-木糖水平較治療前均明顯提升(P<0.
6、05),且恢復(fù)程度明顯優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05),大鼠小腸推進(jìn)功能較治療前明顯亢進(jìn)(P<0.05),
6.在透射電鏡下觀察C組大鼠小腸粘膜超微結(jié)構(gòu),小腸粘膜上皮細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)內(nèi)空泡組織消失,線粒體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)均已恢復(fù)正常:線粒體水腫消失,結(jié)構(gòu)清晰、嵴較清楚,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)保存完整,而B(niǎo)組大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞內(nèi),空泡組織尚未完全消失,仍可以見(jiàn)到水腫的線粒體。
結(jié)論:1.通過(guò)飲食自倍進(jìn)行傷食瀉動(dòng)物造模,該方法可行。2.傷食瀉發(fā)生
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