結(jié)腸黑變病與結(jié)腸癌比較蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、目的：應(yīng)用雙向凝膠電泳蛋白質(zhì)分離技術(shù)(2-DE)及凝膠圖像對比分析，對結(jié)腸黑變病(MC)、結(jié)腸癌及正常組織進行蛋白質(zhì)分離，尋找三者差異表達的蛋白質(zhì)點，以探索MC的發(fā)生、發(fā)展及其與結(jié)腸癌的相關(guān)性。
　　方法：
　　1.采集該院內(nèi)鏡室2013.01-2014.06就診患者的結(jié)腸組織標本，分為MC組7例、結(jié)腸癌組6例及正常對照組6例；
　　2.結(jié)腸組織樣品處理后，取上清液用 Bradford方法測定蛋白質(zhì)濃度；應(yīng)用2-DE技

2、術(shù)進行第一向固相 pH梯度等電聚焦電泳(IPG-IEF)及第二向十二烷基硫酸鈉-聚丙酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)建立 MC、結(jié)腸癌及正常人結(jié)腸組織的雙向凝膠圖譜。
　　3.應(yīng)用掃描儀對凝膠掃描獲取圖像，使用 imagemaster7.0軟件分別分析對比MC患者與結(jié)腸癌患者及正常人的凝膠圖像，篩選出差異表達蛋白質(zhì)點。
　　結(jié)果：
　　1.獲取的凝膠圖像顯示出良好的重復性。各斑點間分離清晰，各組內(nèi)凝膠在蛋白質(zhì)斑點位置上

3、均具有較好的重復性，可以進行圖像分析；
　　2.結(jié)腸癌、MC、正常組織凝膠圖像的平均蛋白質(zhì)斑點數(shù)分別為2150±240，1970±138，2028±176。凝膠圖譜進行比對后，總共找到置信度在95％以上的差異點14個。MC與正常組織對比有6個差異點，其中4個蛋白點在正常組織中表達量較大，2個點在MC中表達量比較大。僅在MC中表達的蛋白質(zhì)點有1個；MC與結(jié)腸癌組織對比有8個差異點，其中1個蛋白點在MC中的表達量比較大，7個蛋白點在結(jié)