α-硫辛酸和NAC在鎘致神經(jīng)細胞氧化損傷和線粒體凋亡通路中的保護效應.pdf

1、為研究α-硫辛酸(α-lipoid acid,α-LA)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)在鎘導致的神經(jīng)細胞氧化損傷及線粒體凋亡通路中的保護作用，本文以妊娠18-19日齡SD大鼠胎鼠原代大腦皮質神經(jīng)元和PC12細胞系為模型，用10μmol/L鎘處理細胞不同時間(0、6、12、24、48 h)，不同濃度鎘(0、5、10、20μmol/L)及10或20αμmol/L鎘與100μmol/Lα-LA或NAC聯(lián)合作用于細胞24 h后，用比色法測定神經(jīng)細

2、胞內超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽還原酶(GR)、谷胱甘肽轉移酶(GST)活力、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及神經(jīng)細胞線粒體內的SOD、CAT、GSH-Px活力和MDA含量，免疫熒光法觀察細胞內活性氧(ROS)的含量變化，流式細胞術及Annexin V-FITC染色法測定細胞凋亡率，免疫印跡法檢測線粒體通路中相關蛋白VDAC，cleavedcaspase-3、9，

3、Bcl-2和Bax蛋白的表達量和Cyt C的釋放情況。
　　結果表明:①與對照組相比，10μmol/L鎘暴露不同時間或不同濃度的鎘暴露24 h能引起SOD、CAT活力顯著或極顯著升高(PC12細胞)或降低（大鼠大腦皮質神經(jīng)元），GSH-Px、GST、GR活力及GSH含量顯著或極顯著下降，MDA、ROS含量顯著或極顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)，且呈現(xiàn)一定的劑量、時間-效應關系。與染毒組相比，鎘聯(lián)合α-LA或NAC后，ROS

4、含量極顯著降低(P＜0.01)，MDA含量顯著或極顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，GSH-Px、GR、GST活力及GSH含量都顯著升高(P＜0.05）;②與對照組相比，不同濃度的鎘暴露24 h能引起神經(jīng)細胞線粒體內SOD、CAT活力顯著或極顯著升高(PC12細胞)或降低（大鼠大腦皮質神經(jīng)元），GSH-Px活力顯著或極顯著下降及MDA含量顯著或極顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)，且呈現(xiàn)一定的劑量-效應關系。與染毒組相比，鎘聯(lián)

5、合α-LA或NAC后，MDA含量顯著或極顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，GSH-Px活力顯著升高（P＜0.05）;③與對照組相比，20μmol/L鎘暴露極顯著增加細胞凋亡率，促進線粒體內CytC的釋放，降低VDAC，Bcl-2蛋白表達，提高cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Bax蛋白表達，差異都極顯著(P＜0.01)。與染毒組相比，鎘聯(lián)合α-LA或NAC后，極顯著抑制細胞凋亡，cleaved