阿里紅提取物對Aβ25-35誘導大鼠及PC12細胞癡呆模型保護作用機制的研究.pdf

1、目的：通過觀察阿里紅提取物對大鼠腎上腺嗜絡瘤細胞（PC12）增殖的影響；研究阿里紅提取物對β-淀粉樣蛋白（Aβ25-35）誘導PC12細胞損傷的保護作用及其對Aβ25-35所致阿爾茨海默病模型大鼠學習記憶障礙、膽堿能系統(tǒng)損害的影響，以探討阿里紅提取物是否具有神經(jīng)保護作用。
　　方法：1）在體外實驗中，采用MTT法篩選出對 PC12細胞增殖活性部位。2）Aβ25-35誘導 PC12細胞損傷建立阿爾茨海默病體外模型；將培養(yǎng)的PC12細

2、胞分為五組：正常對照組，模型組（Aβ25-35損傷組），藥物低劑量組（50μg/mL），藥物中劑量組（100μg/mL），藥物高劑量組（200μg/mL），用MTT法檢測PC12細胞的存活率；AinexinV-FITC/7-AAD雙染法流式細胞儀檢測細胞凋亡；采用RT-PCR法檢測bax和bcl-2基因mRNA的表達水平；Western blot法檢測bax和bcl-2蛋白表達變化。3）在體內(nèi)實驗中，將凝聚狀態(tài)的Aβ25-35（11.5

3、μ mol/L）注入大鼠側腦海馬區(qū)建立大鼠AD模型，采用Morris水迷宮法檢測各組大鼠學習記憶能力的改變；采用HE染色法觀察各組大鼠神經(jīng)元病理形態(tài)的改變；采用生化法檢測各組大鼠腦組織勻漿中 AchE活性的變化；采用免疫組化法檢測大鼠大腦組織ChAT表達的變化。結果：1）阿里紅乙酸乙酯部位可促進PC12細胞的增殖，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；2）與模型組比較，給予阿里紅乙酸乙酯部位處理后的Aβ25-35組，細胞存活率升高（64.

4、36±4.00）％、細胞凋亡率降低（6.1%），RT-PCR結果顯示，bax基因mRNA表達水平明顯降低，bcl-2基因mRNA表達水平明顯增高；Western blot結果顯示，Bax蛋白表達降低，Bcl-2蛋白表達增強；3）與模型組比較，阿里紅提取物乙酸乙酯部位高、中、低劑量組大鼠逃逸潛伏期明顯縮短，目標象限停留時間均明顯延長，穿越平臺次數(shù)增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；海馬神經(jīng)細胞數(shù)量明顯增多，同時明顯降低腦組織勻漿中的