中國漢族人群KSR2基因多態(tài)性與肥胖及脂質(zhì)代謝紊亂的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：
　　以KSR2基因作為研究的候選基因，探討在中國漢族人群中KSR2基因多態(tài)性與肥胖和脂質(zhì)代謝紊亂之間的關(guān)聯(lián)，從遺傳學(xué)角度探討KSR2基因多態(tài)性在中國漢族人群肥胖及脂質(zhì)代謝紊亂中的重要作用，同時(shí)進(jìn)行性別分層研究，探討肥胖和脂質(zhì)代謝紊亂的性別差異性。
　　方法：
　　所有的研究對象都是從南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院常規(guī)健康體檢者中隨機(jī)挑選，共有1722例，包括男性694例，女性1028例，由于部分樣品分型失敗，最終rs

2、7955803分型樣品1676例，包括男性671例，女性1005例，rs10774926分型樣品1703例，包括男性683例，女性1020例。臨床計(jì)量資料的分析項(xiàng)目主要包括體質(zhì)指數(shù)、腰圍、空腹血糖、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇;臨床計(jì)數(shù)資料（病例-對照）的分析項(xiàng)目包括超重、肥胖、中心性肥胖、高甘油三酯血癥、臨界高膽固醇血癥和高膽固醇血癥。脂質(zhì)代謝紊亂的診斷標(biāo)準(zhǔn)為美國國家膽固醇教育計(jì)劃成人治療組第三次會議指南

3、(National Cholesterol Education Program Adult Treatment PanelⅢ,NCEP-ATPⅢ)。KSR2基因各位點(diǎn)的序列及單核苷酸多態(tài)性的相關(guān)信息由美國國立生物技術(shù)信息中心(National Center for Biotechnology Information，NCBI)和國際人類基因組單體型圖計(jì)劃數(shù)據(jù)庫(HapMap Project Database)獲得。經(jīng)過Haploview

4、軟件（版本4.2，Broad Institute，Cambridge，MA，USA）連鎖不平衡(LinkageDisequilibrium，LD)分析，最終選擇KSR2基因中的兩個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行肥胖及脂質(zhì)代謝紊亂的關(guān)聯(lián)研究，分別為:1).rs7955803(C＞T)，位于KSR2基因的編碼區(qū)，產(chǎn)生同義突變(synonymous codon);2).rs10774926(A＞G)，位于KSR2基因的3'端非編碼區(qū)域(3' untr

5、anslated region，3'UTR)。利用經(jīng)典的聚合酶鏈反應(yīng)限制性片段長度多態(tài)性（polymerase chain reaction-restrictionfragment length polymorphism，PCR-RFLP）進(jìn)行基因分型，隨機(jī)抽取總樣本量的5％進(jìn)行直接測序用以評價(jià)分型結(jié)果的準(zhǔn)確性。協(xié)方差分析用于分析各基因型與臨床計(jì)量資料之間的關(guān)聯(lián)，做整體未分層分析時(shí)將年齡及性別視為協(xié)變量校正，按照性別分層研究時(shí)將年齡視為

6、協(xié)變量校正;利用Logistic回歸模型分析基因多態(tài)性與臨床計(jì)數(shù)資料（病例-對照研究）的關(guān)聯(lián)研究，做整體未分層分析時(shí)將年齡及性別視為協(xié)變量校正，按照性別的分層研究時(shí)將年齡視為協(xié)變量校正。上述數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS(Statistic Package for Social Science)（版本20.0）統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。R語言統(tǒng)計(jì)軟件（版本3.0.1）的haplo.stats(Statistical Analysis ofHaplotyp

7、es)數(shù)據(jù)包用于統(tǒng)計(jì)分析單體型的頻率及其與肥胖及脂質(zhì)代謝紊亂之間的風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)果：
　　KSR2基因多態(tài)性與超重、中心型肥胖和脂質(zhì)代謝紊亂之間的關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:
　　(1)rs7955803與高密度脂蛋白膽固醇及腰圍之間的關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　分型成功1676個(gè)研究對象，其中男性為671例，女性為1005例。在顯性效應(yīng)模型中，rs7955803與高密度脂蛋白膽固醇及腰圍之間的關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（各自P值為P

8、=0.028; P=0.016），T等位基因攜帶者（CT基因型和TT基因型）與野生型CC基因型相比，其腰圍水平較低且高密度脂蛋白膽固醇水平較高。
　　(2)rs7955803與女性中心性肥胖的風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　在顯性效應(yīng)模型中，rs7955803與女性腰圍之間的關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.024)，T等位基因攜帶者與野生型CC基因型相比，其平均腰圍水平減少1.05厘米，但是這個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與男性腰圍以及空腹血糖、甘油三酯

9、和膽固醇等其他臨床計(jì)量資料之間無關(guān)聯(lián)（P值均大于0.05）。在女性腰圍正常的人群中，rs7955803的各基因型分布符合哈迪-溫伯格平衡（P大于0.05），進(jìn)一步進(jìn)行病例-對照分析發(fā)現(xiàn)T等位基因攜帶者發(fā)生中心性肥胖的風(fēng)險(xiǎn)低于CC基因型，T等位基因攜帶者發(fā)生中心性肥胖的風(fēng)險(xiǎn)僅為CC基因型的一半(OR=0.50，95％CI:0.28-0.91，P=0.023)。
　　(3)rs10774926與女性空腹血糖、總膽固醇及低密度脂蛋白膽固

10、醇之間的關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　分型成功1703個(gè)研究對象，其中男性為683例，女性為1020例。rs10774926與女性空腹血糖、總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇之間的關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（各自P值為P=0.028;P=0.019;P=0.028），其中GG基因型的空腹血糖值高于A等位基因攜帶者(AG基因型和AA基因型)，AA基因型的總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇水平分別高于AG基因型和GG基因型。在顯性模型中，男性G等位基因攜帶者（AG

11、基因型和GG基因型）的總膽固醇水平高于AA基因型(P=0.049)，然而在女性中G等位基因攜帶者的總膽固醇水平低于AA基因型(P=0.006)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)女性G等位基因攜帶者的低密度脂蛋白膽固醇水平低于AA基因型(P=0.009)。
　　(4)rs10774926與男性超重及高甘油三酯血癥的風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　在男性體重和血脂正常人群中，rs10774926的各基因型分布符合哈迪-溫伯格平衡（P均大于0.05），進(jìn)一步進(jìn)

12、行病例-對照研究，顯性模型分析發(fā)現(xiàn)男性G等位基因攜帶者比A等位基因攜帶者更容易發(fā)生超重及高甘油三酯血癥(OR=1.37,95％CI:0.99-1.89,P=0.049; OR=1.52,95％CI:1.14-2.02,P=0.003)。與男性AA基因型相比較，男性GG基因型發(fā)生超重及高甘油三酯血癥風(fēng)險(xiǎn)更高(OR=4.41,95％CI:1.26-15.37,P=0.020; OR=2.29,95％CI:1.03-5.11,P=0.043)

13、。
　　(5)rs7955803和rs10774926構(gòu)成的單體型與男性高甘油三酯血癥的風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　男性人群中，單體型CG比單體型CA發(fā)生高甘油三酯血癥的風(fēng)險(xiǎn)更高(OR=1.52,95％CI:1.11-2.09，P=0.004)。
　　結(jié)論：
　　在中國漢族人群中，KSR2基因多態(tài)性與超重、肥胖和脂質(zhì)代謝紊亂的風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)通過性別分層研究發(fā)現(xiàn)KSR2基因多態(tài)性存在性別差異。我們的研