兔尿源性干細胞復合小腸粘膜下層脫細胞基質(zhì)構(gòu)建組織工程尿道的研究.pdf

1、尿道損傷的病因包括創(chuàng)傷、先天性畸形、感染等，臨床上主要表現(xiàn)為尿道狹窄、閉鎖或缺失，導致排尿功能障礙，甚至可使膀胱、腎臟功能受損，嚴重影響患者生活質(zhì)量。尿道狹窄的治療措施包括包括尿道擴張、尿道內(nèi)放置支架、尿道內(nèi)切開、尿道端-端吻合和尿道成形術(shù)等。其中，尿道端-端吻合術(shù)能解決長度小于2cm的狹窄。但當尿道狹窄長度大于2cm時，直接采用狹窄段切除、端-端吻合的常規(guī)手術(shù)方法，會導致陰莖彎曲、勃起疼痛。因此，對于長度大于2cm的尿道狹窄須采用新的

2、尿道替代材料進行尿道的修復與重建。
　　目的:
　　長段尿道的狹窄或缺失是臨床上泌尿外科醫(yī)生面臨的一個比較棘手的難題，組織工程技術(shù)是解決這一難題的途徑之一。本研究擬以誘導分化后的尿源性干細胞(USCs)為種子細胞，經(jīng)5％過氧乙酸(PAA)氧化脫細胞處理的小腸粘膜下層脫細胞基質(zhì)(SIS)為支架，于體外構(gòu)建成組織工程尿道，為后續(xù)長段尿道損傷的動物實驗研究提供尿道修復材料。
　　方法:
　　通過無菌導尿術(shù)收集6只健康成

3、年雄性新西蘭大白兔（體重2.0～2.5kg之間）尿液。采用離心分離法分離尿源性干細胞，于體外誘導其向尿路上皮細胞和平滑肌細胞方向分化;取健康豬小腸，物理方法獲取小腸粘膜下層，系統(tǒng)比較經(jīng)不同濃度過氧乙酸(PAA)氧化脫細胞處理的SIS的體外機械性能、殘余DNA量、殘余生長因子含量、電鏡檢測、切片染色及細胞粘附性等結(jié)果，確定SIS的最佳制備方法;于體外將誘導分化的上皮細胞和平滑肌細胞作為種子細胞種以“分層共培養(yǎng)”的方式在動態(tài)的環(huán)境下種植于S

4、IS上，通過組織切片染色等相關(guān)組織學檢查檢測細胞于SIS上的復合效果。
　　結(jié)果:
　　經(jīng)5％PAA氧化脫細胞處理的SIS脫細胞徹底，組織間孔隙多，內(nèi)部疏松，更有利于種子細胞粘附、滲透、增殖和分化，可作為組織工程尿道的支架材料;與靜態(tài)培養(yǎng)環(huán)境相比，動態(tài)培養(yǎng)環(huán)境加強了細胞在SIS的滲透作用，“分層共培養(yǎng)”使細胞能夠形成多層的生長狀態(tài)，以此方式構(gòu)建的組織工程尿道，使尿源性干細胞誘導分化的尿路上皮細胞、平滑肌細胞能以類似尿道組織細