晝夜節(jié)律基因Per1在正畸過程中對牙周組織內相關基因表達的影響.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分 晝夜節(jié)律基因Per1對成骨相關基因表達影響的體外研究
　　目的:研究體外成骨細胞中，晝夜節(jié)律基因Per1對成骨相關基因表達的影響。
　　方法:體外培養(yǎng)小鼠成骨細胞系MC3T3-E1，加入地塞米松（dexamethasone，DEX）干預按時間節(jié)點0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、16 h、20 h、24 h收集細胞，使用熒光定量PCR檢測Per1（Period1）

2、和成骨細胞相關基因ALP、OC和MMP-2的表達。
　　結果:使用DEX干預后，Per1基因表達在8 h達到峰值，約為初始表達量的9倍。成骨細胞相關基因ALP表達在8h出現(xiàn)峰值；成骨細胞相關基因OC在12h達到峰值，為初始表達量的20余倍；成骨細胞相關基因MMP2表達量明顯降低，4h出現(xiàn)低值后緩慢增加，12h達到與原始值持平。
　　結論:使用DEX干預MC3TE-E1細胞后，成骨細胞相關基因ALP、OC、MMP2的表達量會隨

3、Per1基因表達量發(fā)生相應的改變。
　　第二部分 正畸牙移動模型的建立及晝夜節(jié)律基因Per1對牙周組織中相關基因表達的影響
　　目的:建立正畸牙移動模型并研究正畸加力組織中晝夜節(jié)律基因Per1表達的規(guī)律性。
　　方法:選取8周齡的雄性SD大鼠，按照照明和黑暗時間相等的條件下飼養(yǎng)1周后，每只鼠在上頜前牙與右側上頜第一磨牙間安裝正畸加力裝置。矯正2周，Micro-CT測量牙齒水平移動距離。2周后將9組SD鼠分別在24小時內

4、的9個等距時間節(jié)點處死，取正畸加力組織分別行組織學分析和晝夜節(jié)律基因Per1、成骨相關基因ALP、OC、MMP-2，破骨相關基因TRAP、DC-STAMP的定量檢測。結果矯正2周后，牙齒平均移動距離是0.45毫米。形態(tài)學分析顯示第一磨牙近中牙槽骨吸收。遠中出現(xiàn)新形成骨。實時熒光定量PCR結果提示Per1基因24小時內有兩個峰值出現(xiàn)在ZT3和ZT15。ZT15大概是ZT0的8倍。成骨細胞相關基因ALP表達在ZT3和ZT15為峰值。成骨細胞

5、相關基因OC在ZT6和ZT18達現(xiàn)峰值，ZT18為初始表達量的10余倍。成骨細胞相關基因MMP2表達量明顯降低，ZT3出現(xiàn)低值后開始增加，ZT9達到與峰值，破骨細胞相關基因TRAP在ZT3和ZT15出現(xiàn)峰值，ZT15約為初始值7倍。破骨細胞相關基因DC-STAMP在ZT18出現(xiàn)峰值。約為初始值5倍。
　　結果:矯正2周后，牙齒平均移動距離是0.45毫米。形態(tài)學分析顯示第一磨牙近中牙槽骨吸收。遠中出現(xiàn)新形成骨。實時熒光定量PCR結果

6、提示Per1基因24小時內有兩個峰值出現(xiàn)在ZT3和ZT15。ZT15大概是ZT0的8倍。成骨細胞相關基因ALP表達在ZT3和ZT15為峰值。成骨細胞相關基因OC在ZT6和ZT18達現(xiàn)峰值，ZT18為初始表達量的10余倍。成骨細胞相關基因MMP2表達量明顯降低，ZT3出現(xiàn)低值后開始增加，ZT9達到與峰值，破骨細胞相關基因TRAP在ZT3和ZT15出現(xiàn)峰值，ZT15約為初始值7倍。破骨細胞相關基因DC-STAMP在ZT18出現(xiàn)峰值。約為初始