P-REX2a在胃癌中的表達及其對阿霉素耐藥影響的初步研究.pdf

1、目的：檢測臨床手術(shù)切除的胃癌組織中 P-REX2a的表達規(guī)律，并探討其在胃癌細胞阿霉素耐藥中的作用機制。
　　方法：（1）利用熒光實時定量RT-PCR與Western blot檢測正常組織、癌旁組織、胃癌組織中P-REX2a mRNA和蛋白水平的表達，并探討其與胃癌TNM分期的聯(lián)系。（2）通過siRNA技術(shù)干擾胃腺癌細胞SGC7901中P-REX2a的表達，利用MTT檢測其對細胞增殖的影響；聯(lián)合0.3μM阿霉素處理24h，流式檢測

2、細胞凋亡，同時Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Bax與Bcl-2的表達，觀察其對阿霉素藥物敏感性的影響。（3）Western blot檢測PTEN/PI3K/Akt通路中PTEN、Akt、p-Akt蛋白表達，并用以PIP3為底物的定磷比色法測定PTEN磷酸酶活性，初步探討P-REX2a在細胞耐藥中的作用機制。
　　結(jié)果：（1）在正常胃組織、癌旁組織、胃癌組織中P-REX2a在mRNA和蛋白水平的表達依次升高（p<0.05）

3、；在胃癌組織中P-REX2a的表達隨著TNM分期的推后而增多。（2）成功下調(diào)胃腺癌細胞SGC7901中P-REX2a的表達后，MTT結(jié)果顯示細胞增殖能力減弱（p<0.05）；聯(lián)合阿霉素處理時，相對于其他組別，下調(diào)組的凋亡率明顯上升（p<0.05），同時Bax表達升高、Bcl-2降低（p<0.05）。（3）阿霉素處理下調(diào)P-REX2a的SGC7901細胞時，各組PTEN、Akt表達不變，相對于對照組PTEN磷酸酶活性升高（p<0.05），