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文檔簡介
1、核磷蛋白(Nucleophosmin,NPM1)是一種多功能蛋白,可參與核糖體的生物合成,通過調節(jié)中心體的復制來維持基因組的穩(wěn)定性,可在核質間穿梭,具有分子伴侶作用,并可通過多種信號通路調節(jié)細胞增殖和凋亡,參與多種腫瘤的發(fā)生。
本實驗利用原位雜交的方法檢測了NPM1在小鼠性成熟卵巢、PMSG誘導的卵泡發(fā)育過程、hCG誘導的排卵以及黃體形成中的表達。在小鼠性成熟過程中,即從出生開始到出生后40天,NPM1mRNA在各個階段的
2、卵泡中均有表達。NPM1mRNA在原始卵泡和初級卵泡的顆粒細胞中表達,隨著卵泡發(fā)育,在次級卵泡和有腔卵泡的顆粒細胞中的表達增強。在成熟卵泡中,NPM1mRNA在卵丘顆粒細胞中表達較強,壁顆粒細胞中表達減弱。在PMSG誘導的小鼠卵泡發(fā)育過程中,NPM1mRNA在顆粒細胞中的表達從PMSG處理后的第6小時開始增強,在第12小時出現峰值,此時顆粒細胞處于增殖時期。在第36小時和48小時,顆粒細胞增殖下降,NPM1mRNA在顆粒細胞中的表達明顯
3、減弱。此外,小鼠注射PMSG48小時之后注射hCG,誘導成熟卵泡排卵。在hCG處理后4小時和8小時,NPM1mRNA分別在排卵前的GVBD和卵丘擴展時的卵丘顆粒細胞中有較強的表達。在hCG處理后16小時和18小時的排卵后的卵泡中,NPM1mRNA在壁顆粒細胞中表達較弱。注射PMSG48小時后注射hCG,2至3天后,NPM1mRNA在黃體形成過程中的黃體中有較強的表達。
我們于體外培養(yǎng)了小鼠原代顆粒細胞,用不同濃度的NPM1
4、的特異性抑制劑NSC348884(0μM,0.5μM,1μM,2μM)處理24h后,利用RT-PCR技術檢測了NPM1、P450scc、StAR基因的表達情況。結果顯示P450scc基因的表達量隨著NSC348884濃度的增加而下降,而StAR的表達沒有顯著的變化趨勢,推測NPM1可能通過作用于P450scc促進類固醇激素的合成。
這些結果表明,NPM1可能在小鼠卵泡發(fā)育的顆粒細胞增殖和黃體形成過程中起重要作用,并且可能促
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