流感病毒感染下激活α7nAChR對IL-4誘導(dǎo)巨噬細胞M2型極化的影響.pdf

1、研究背景：巨噬細胞（MΦ）受到病原體及其LPS，IFN-γ等刺激，會產(chǎn)生M1型極化，參與炎癥反應(yīng)；在細胞因子如IL-4、IL-13等作用下，會產(chǎn)生M2型極化，參與炎癥修復(fù)。迷走神經(jīng)釋放的乙酰膽堿可以通過α7 nAChR減輕MΦ因LPS或細菌刺激引起炎癥反應(yīng)，但不調(diào)控M2型極化。流感病毒感染下，激活α7 nAChR是否影響MΦM2極化未見報道。
　　目的：激活α7 nAChR是否影響流感病毒感染IL-4誘導(dǎo)的MΦM2極化及其分子機制

2、。
　　方法：α7 nAChR特異性激動劑（GTS-21）預(yù)處理BMDM，然后感染流感病毒（PR8），6 h后接受IL-4刺激，24 h收取細胞，提取RNA和蛋白進行Q-PCR和免疫印跡實驗，檢測Arg1的表達等。野生型、α7 nAChR或Akt1敲除小鼠BMDM用來對實驗結(jié)果進行證實。在體用PR8感染野生型和α7 nAChR或Akt1敲除小鼠，感染后3、5天處死小鼠取BALF細胞和肺臟進行Arg1等分子測定。
　　結(jié)果：激

3、活MΦα7 nAChR能增強IL-4誘導(dǎo)Arg1（M2型極化的標記分子）的表達但不影響參與M2型極化的轉(zhuǎn)錄因子水平，如p-STAT6。在野生型BMDM中，激活α7 nAChR可以劑量依賴性地抑制Akt磷酸化。在α7 nAChR敲除的BMDM中，激活α7 nAChR不能促進IL-4誘導(dǎo)的Arg1的表達。在Akt1敲除的BMDM中，激活α7 nAChR促進IL-4誘導(dǎo)MΦ的M2型效率顯著降低。α7 nAChR敲除小鼠感染流感病毒較野生型小鼠