FK866在卵巢癌裸鼠移植瘤中的作用及機(jī)制的研究.pdf

1、目的：建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型，研究煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(Nampt)在卵巢癌裸鼠移植瘤中的表達(dá)情況，并通過Nampt特異性抑制劑FK866處理裸鼠，探討Nampt參與卵巢癌的作用機(jī)制。研究FK866抗卵巢癌的作用及機(jī)制。
　　方法：采用人卵巢腺癌SKOV3細(xì)胞株，種植于24只雌性Balb/c-nu裸鼠頸背部皮下，隨機(jī)平均分成4組：聯(lián)合用藥組、FK866組、順鉑（DDP）組及對照（Control）組。實(shí)驗(yàn)自SKOV3卵巢癌細(xì)胞接種

2、第21天腫瘤大小約100mm3開始，F(xiàn)K866，按20 mg/kg劑量，每天腹腔內(nèi)注射給藥兩次，連續(xù)給藥4天，后停藥3天，再次連續(xù)給藥4天后停藥3天；DDP，每周兩次，每次5mg/kg,腹腔內(nèi)注射，連續(xù)兩周；對照組用生理鹽水。給藥2周后，采用頸椎脫臼處死裸鼠，完整取出瘤塊，研究實(shí)驗(yàn)組對裸鼠卵巢癌移植瘤成瘤及生長的影響，采用生化檢測、實(shí)時(shí)定量PCR檢測、蛋白質(zhì)印跡檢測及免疫組織化學(xué)法檢測聯(lián)合用藥組、FK866組、DDP組及對照組中NAD、

3、Nampt、p53、和Sirt1的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　?。?）FK866與順鉑均能使裸鼠皮下移植瘤的體積減小，但FK866較明顯，在聯(lián)合用藥組移植瘤體積顯著減?。?br>　?。?）采用生化檢測發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)K866能顯著減少NAD的含量，而DDP不能，聯(lián)合用藥組NAD減少更顯著；
　?。?）通過實(shí)時(shí)定量PCR檢測、蛋白質(zhì)印跡檢測及免疫組織化學(xué)法檢測發(fā)現(xiàn)，在聯(lián)合用藥組中的Nampt蛋白表達(dá)減少，p53表達(dá)增加，Sirt1

4、表達(dá)減少。
　　結(jié)論：
　　（1）Nampt蛋白特異性抑制劑FK866能顯著抑制荷瘤鼠腫瘤的增長；
　?。?）Nampt蛋白特異性抑制劑FK866與常用化療藥物順鉑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)能更顯著抑制荷瘤鼠腫瘤的增長；
　?。?）Nampt蛋白特異性抑制劑FK866抗卵巢癌的作用機(jī)制可能與抑制Nampt的活性，減少NAD的合成，進(jìn)而下調(diào)Sirt1的表達(dá)，上調(diào)p53基因的表達(dá)有關(guān)；
　?。?）本研究結(jié)果為臨床上治療卵巢癌提