神經(jīng)病理性疼痛小鼠海馬orexins的變化及其信號機(jī)制研究.pdf

1、研究目的：
　　本研究擬采用形態(tài)學(xué)、行為學(xué)、分子生物學(xué)和免疫學(xué)手段，在小鼠坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷模型上，探討orexin系統(tǒng)在神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生發(fā)展中的作用及其可能的信號機(jī)制，為慢性疼痛的防治提供理論依據(jù)。
　　研究方法：
　　雄性bal b/c成年小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham組）和CCI組，測定各組小鼠機(jī)械痛閾和熱痛閾基礎(chǔ)值后，參考Bennett和Xie等的方法建立小鼠左側(cè)CCI模型。Sham組進(jìn)行同樣的手術(shù)，暴露

2、坐骨神經(jīng)但不結(jié)扎。分別于術(shù)后1、4、7、14、21、28天測定各組小鼠的機(jī)械痛閾和熱痛閾。模型動物在深麻醉下處死，取下丘腦、海馬，采用實時熒光定量PCR方法檢測下丘腦p-orexin、海馬OXR-1、OXR-2的表達(dá)，并用免疫印跡(Western blot)方法檢測海馬pCREB、pERK的表達(dá)。
　　研究結(jié)果：
　　1，兩組小鼠術(shù)前的機(jī)械刺激縮足反應(yīng)閾(Paw mechanical withdrawal threshold

3、，PMWT)、熱刺激縮足反應(yīng)閾（Paw thermal withdrawal latency，PTWL）沒有顯著性差異(P＞0.05)。術(shù)后第4天至28天的各時間點CCI組小鼠PMWT較sham組明顯降低(P＜0.05)。術(shù)后第1天至28天的各時間點CCI組小鼠PTWL較sham組明顯降低（P＜0.05）。
　　2，應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)，海馬OXR-2基因在CCI后21、28天較Sham組表達(dá)降低（P＜0.01）。下丘腦p-

4、orexin基因在CCI后7天內(nèi)的表達(dá)較Sham組有上升趨勢（P＜0.05），CCI術(shù)后14天較sham組開始有下降趨勢（P＜0.01）。海馬OXR-1基因在CCI后14、21天較sham組的表達(dá)升高(P＜0.05)。
　　3，應(yīng)用western blot技術(shù)，海馬pCREB、pERK在CCI后21、28天較Sham組明顯減低（P＜0.05），海馬CREB、ERK在CCI后各天表達(dá)未見明顯變化。
　　研究結(jié)論：
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