新型釕配合物的合成及抗腫瘤活性研究.pdf

1、惡性腫瘤是當前危害人類健康的主要疾病之一。長期以來，尋找用于惡性腫瘤治療的藥物一直是全世界藥物研發(fā)的熱點，上世紀六十年代，人類發(fā)現(xiàn)了一類無機化合物鉑類配合物的抗癌活性。如今，鉑類藥物已經(jīng)被應用于85％的腫瘤治療方案中。金屬釕配合物被認為是最具有發(fā)展?jié)摿Φ目鼓[瘤藥物之一。但是，在鉑類藥物的臨床使用過程中，其缺點也開始日益凸顯，其毒副作用如腎毒性、骨髓毒性、耳毒性、外周神經(jīng)毒性、催吐性及長期使用產(chǎn)生的耐藥性等，以及鉑類藥物對一些腫瘤的治療無

2、效，這使其應用受到限制。因此，尋找新的抗腫瘤金屬配合物引起了更多研究者的關注。
　　本課題通過設計合成不同釕金屬配合物，研究其生物活性，經(jīng)過篩選得到了14種具有較強抗腫瘤活性的釕金屬配合物，使用MTT檢測、配合物的內(nèi)吞實驗、吖啶橙和溴化乙啶雙染實驗、細胞周期檢測試驗、細胞活性氧水平檢測試驗、線粒體膜電位檢測、單細胞凝膠電泳檢測、蛋白免疫印跡法等實驗方法，通過對Bel-7402、Mg-63、A549、SK-BR-3、Hela等腫瘤細

3、胞的作用研究，初步證實這些新型釕配合物具有誘導腫瘤細胞凋亡的作用，并在此基礎上試圖探討配合物誘發(fā)腫瘤細胞凋亡的相關機理。
　　以下將分章介紹研究的具體內(nèi)容。
　　第一章前言以釕金屬配合物為主介紹金屬配合物的研究及應用現(xiàn)狀。
　　第二章合成新型配體CPIP，并與五個輔助配體bpy、phen、dmb、dip、dmp反應合成五個新的釕金屬配合物，分別簡稱為C1、C2、C3、C4、C5。檢測配合物對NIH-3T3、Bel-74

4、02、Mg-63、A549、SK-BR-3五種細胞的抑制作用。發(fā)現(xiàn)這些化合物對Bel-7402細胞的IC50較低。通過內(nèi)吞實驗結(jié)果、吖啶橙和溴化乙錠雙染實驗結(jié)果和線粒體膜電位檢測結(jié)果可以初步判斷，配合物進入細胞內(nèi)，并通過線粒體途徑誘導細胞凋亡。
　　第三章合成新型配體DCPIP，并與五個輔助配體bpy、phen、dmb、dip、dmp反應合成五個新的釕金屬配合物，分別簡稱為D1、D2、D3、D4、D5。檢測配合物對NIH-3T3、

5、Bel-7402、Mg-63、A549、SK-BR-3五種細胞的抑制作用。發(fā)現(xiàn)這些化合物對Bel-7402細胞的IC50較低。內(nèi)吞實驗發(fā)現(xiàn)配合物進入Bel-7402細胞的內(nèi)部，活性氧及線粒體膜電位實驗結(jié)果顯示，這些配合物通過線粒體途徑引起B(yǎng)el-7402細胞凋亡。
　　第四章合成新型配體ATATP，并與四個輔助配體bpy、dmb、phen、dmp反應合成四個新的釕金屬配合物，分別簡稱為M1、M2、M3、M4。檢測這些配合物對于NI

6、H-3T3、Bel-7402、Mg-63、A549、Hela五種細胞的抑制作用。發(fā)現(xiàn)這些配合物對于Hela細胞的IC50較低。染色結(jié)果顯示，化合物進入細胞內(nèi)部，活性氧及線粒體膜電位實驗結(jié)果顯示，其誘發(fā)細胞凋亡的途徑也是線粒體途徑。
　　第五章通過蛋白免疫印跡法、單細胞凝膠電泳等方法重點研究C4和D1誘導Bel-7402細胞凋亡的相關機理，研究M1誘導Hela細胞凋亡的相關機理。結(jié)果顯示，Bcl-2、Bcl-x等蛋白表達量下調(diào)，Ca