LPS誘導(dǎo)細(xì)胞損傷對(duì)細(xì)胞表面唾液酸影響的初步研究.pdf

1、已有研究表明，唾液酸是一種重要的糖物質(zhì)，位于細(xì)胞表面糖綴合物的最末端，在細(xì)胞粘附、識(shí)別、炎癥反應(yīng)以及腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著重要作用。血管內(nèi)皮細(xì)胞表面唾液酸的改變與心血管疾病、癌癥等疾病的發(fā)生及發(fā)展緊密相關(guān)。因此對(duì)細(xì)胞表面唾液酸以及其相關(guān)的唾液酸糖基轉(zhuǎn)移酶的功能研究具有重要的意義。
　　本論文利用LPS誘導(dǎo)細(xì)胞，建立血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型，在此基礎(chǔ)上，使用凝集素SNA及MAA對(duì)細(xì)胞表面唾液酸進(jìn)行熒光標(biāo)記，并利用流式細(xì)胞術(shù)與激光共聚焦

2、顯微鏡對(duì)細(xì)胞損傷后其表面唾液酸變化進(jìn)行分析。結(jié)果表明，1-10μg/mL的LPS處理可引起細(xì)胞的部分損傷。SNA結(jié)合唾液酸的流式結(jié)果顯示，當(dāng)LPS處理4 h時(shí)，α-2,6唾液酸含量略有降低，其中10μg/mL LPS處理組的熒光強(qiáng)度比對(duì)照組降低了31％。當(dāng)LPS處理24h時(shí)，α-2,6唾液酸含量顯著增加，其中10μg/mL LPS處理組的熒光強(qiáng)度比對(duì)照組升高了119%。該結(jié)果與SNA染色的激光共聚焦結(jié)果相一致。MAA結(jié)合唾液酸的流式結(jié)果

3、顯示，當(dāng)LPS處理4h時(shí)，α-2,3唾液酸含量也存在降低趨勢(shì)，其中1μg/mL LPS處理組的熒光強(qiáng)度比對(duì)照組降低了42%。當(dāng)LPS處理24h時(shí)，10μg/mL LPS處理組的α-2,3唾液酸的熒光強(qiáng)度比對(duì)照組升高了37%。該結(jié)果與MAA染色的激光共聚焦結(jié)果相一致。
　　在獲得細(xì)胞損傷后細(xì)胞表面唾液酸的變化情況后，我們初步研究唾液酸相關(guān)的糖基轉(zhuǎn)移酶變化情況。qRT-PCR結(jié)果表明，LPS處理細(xì)胞后，細(xì)胞的ST3-1、ST3-4及S