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文檔簡介
1、目的:研究力竭游泳運動及恢復期對成年SD大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)、有氧氧化酶活性表達以及生肌調(diào)節(jié)因子MyoD、myogenin蛋白表達的影響。
方法:以36只8周齡健康雄性SD大鼠為研究對象。將其隨機分為6組,每組6只:A,安靜對照組(Contro1);B,力竭運動即刻組(E0);C,力竭運動后12h組(E12);D,力竭運動后24h組(E24);E,力竭運動后48h組(E48);F,力竭運動后72h組(E72)。各力竭運動組進
2、行為期一周的負重力竭性游泳運動,并于末次力竭運動后的不同時間點宰殺取樣。所有大鼠用烏拉坦腹腔麻醉、宰殺后迅速取腓腸肌、比目魚肌、股外側(cè)肌、股直肌,部分液氮冷凍保存待用,另一部分分別用4%多聚甲醛或2.5%戊二醛固定。電鏡下觀察大鼠股直肌超微結(jié)構(gòu)的變化:用琥珀酸脫氫酶試劑盒測定腓腸肌中琥珀酸脫氫酶(SDH)的活性,蛋白定量用考馬斯亮蘭測定;采用SABC-DAB免疫組化方法檢測大鼠比目魚肌和股外側(cè)肌中生肌調(diào)節(jié)因子MyoD、myogenin蛋
3、白表達。
結(jié)果:
1)經(jīng)一周力竭性游泳運動后,與安靜組相比,運動組大鼠腓腸肌中SDH活性顯著升高(P<0.05):與E0組相比,E12組和E24組腓腸肌中SDH活性顯著降低(P<0.05);與E24組相比,E72組腓腸肌中SDH活性顯著升高(P<0.05)。本實驗中,一周力竭游泳運動即刻及恢復期間SDH活性變化大體趨勢是先快速升高,后降低,隨后又階段性升高的情況。
2)電鏡下觀察大鼠股直肌的超微
4、結(jié)構(gòu),安靜對照組肌原纖維結(jié)構(gòu)完整、排列緊密,橫紋清晰,肌絲排列規(guī)則,能清楚分辨出各帶及線。力竭運動后骨骼肌超微形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生了程度不同的改變,這些改變在E0組和E24組更加明顯。游泳運動后骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的變化主要表現(xiàn)為肌節(jié)明、暗帶的肌原纖維、Z線以及線粒體等,本實驗中這些變化以E24組最為嚴重。如明顯的Z線異常,肌節(jié)縱向不規(guī)則的大范圍內(nèi)斷裂,肌原纖維內(nèi)線粒體數(shù)目增多,腫脹,水性變及空泡化,呈多形態(tài),嵴增加,排列亂等。
3)安
5、靜對照組大鼠比目魚肌和股外側(cè)肌中,免疫組化結(jié)果未發(fā)現(xiàn)有MyoD與myogenin蛋白表達:經(jīng)一周力竭性游泳運動后,在大鼠比目魚肌中,MyoD在E24組表達明顯,E48組達到高峰,E72組有所降低,但仍高于E24組;比目魚肌中myogenin在E24組少量表達,E48組表達量也較少,僅比E24組多,E72組明顯表達,其量達到高峰;另一方面,在大鼠股外側(cè)肌中,MyoD在E24組表達明顯,E48組達到高峰,E72組表達依然明顯,但要比E24組
6、略低;股外側(cè)肌中myogenin在E24組少量表達,E48組表達清晰,E72組達到高峰;MyoD在E48、E72組比目魚肌(慢肌)中蛋白表達比股外側(cè)肌(快肌)中明顯要高,而在E24組中表達量卻相反;但myogenin在E24組、E48組和E72組股外側(cè)肌(快肌)中蛋白表達則一直都高于比目魚肌(慢肌)。
結(jié)論:
1)一周大負荷運動后,大鼠腓腸肌中SDH的活性變化出現(xiàn)運動即刻快速升高,恢復期內(nèi)顯著下降,但是隨著恢
7、復時間的延長又逐漸升高的現(xiàn)象,提示一周的大負荷游泳運動可以提高大鼠有氧氧化酶SDH的活性。
2)大鼠股直肌電鏡下觀察結(jié)果顯示,一周大負荷游泳運動能夠引起骨骼肌超微結(jié)構(gòu)較為顯著的變化,如:肌纖維A帶拉長,肌原纖維排列紊亂,Z線大范圍內(nèi)不規(guī)則,相鄰間斷裂,可見Z線流等。表明大負荷向心運動也可作為觀察骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的重要模型之一。
3)SABC免疫組織化學結(jié)果顯示,大負荷運動后24h、48h、72h,在大鼠比目魚肌
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